常用微生物染色法.doc

文档介绍：,加95%乙醇20ml,使溶解为甲液,,加水80ml,使溶解为乙液。甲、乙液相混,静置48小时后使用。贮存在密闭的棕色瓶中。有效期为3个月。,加水3~5ml,使溶解,,用力振摇,使之全部溶解,加水稀释至300ml,即得,贮存在棕色瓶中。密闭保存,有效期为1个月。3脱色液:95%乙醇。4复染液:沙黄(番红)复染液:,加95%乙醇10ml溶解,然后再加纯化水至100ml即得。稀石碳酸复红染液:,研细,加95%乙醇25ml。放置过夜,用滤纸过滤,加5%石碳酸水溶液20ml混合,为石碳酸复红液,再取此液10ml,加水90ml,即成稀石碳酸复红液。:、干燥在载玻片上,滴一滴无菌水或生理盐水,用接种环挑少许菌苔在水涂成一薄层;或将长菌的培养液取少许轻轻涂在载玻片上,自然干燥,也可以在微火焰上通过几次,使菌体固定。,覆盖约1分钟,水洗,(勿使水直接冲洗涂片处)。b滴加碘液,覆盖约1分钟,水洗、吸干。C用95%的乙醇褪色至脱色乙醇不呈紫色为止,约20~30秒,水洗吸干。D滴加沙黄染液或稀石碳酸复红染1分钟,水洗吸干。3染色结果革兰氏阳性菌染成紫色,革兰氏阴性菌染成红色。,以免影响涂片质量。,否则看不清单个菌落形态。易出现假阳性。,不可过热,以载玻璃片不烫手为宜。—24小时的菌为宜,革兰氏阴性菌染色反应较稳定,不受菌龄的影响。革兰氏阳性菌易受菌龄影