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蛋白质沉淀反应(实验).ppt

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蛋白质沉淀反应(实验).ppt

上传人:1485173816 2019/5/11 文件大小:101 KB

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蛋白质沉淀反应(实验).ppt

文档介绍

文档介绍:蛋白质的沉淀反应一、目的要求:了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义二、实验原理:在水溶液中的蛋白质分子由于表面生成水化层和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒,在一定的理化因素影响下,蛋白质颗粒可因失去电荷和脱水,甚至变性,则以固体形式从溶液中析出,这个过程称为蛋白质的沉淀反应。蛋白质的沉淀反应可分为两类。()可逆的沉淀反应蛋白质虽然沉淀析出,但蛋白质分子的结构尚未发生显著变化,除去引起沉淀的因素后,蛋白质的沉淀仍能溶解于原来溶剂中,并保持其天然性质而不变性。属于这类反应的有;蛋白质的盐析作用或在低温下用乙醇(或***)短时间作用于蛋白质。提纯蛋白质时,常利用此类反应。()不可逆沉淀反应此时蛋白质分子内部结构发生重大改变,蛋白质常变性而沉淀,不再溶于原来溶剂中。加热、重金属盐、过酸、过碱、震荡、超声波或某些有机酸都能使蛋白质发生不可逆沉淀反应。蛋白质变性后,有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在(如电荷),并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀,而沉淀的蛋白质也未必都已变性三、实验材料与设备:(一)材料鲜鸡蛋清,用蒸馏水稀释至,搅拌后用层纱布过滤,新鲜配制。(二)试剂蛋白质溶液取蛋清,用蒸馏水稀释至,搅拌均匀后,用纱布过滤浓蛋白溶液鸡蛋清稀释倍()方法同上饱和硫酸铵,***银,醋酸铅溶液浓盐酸,浓硫酸,浓***,硫酸铜,醋酸,醋酸,饱和***化钠溶液,溶液,醋酸鞣酸,饱和苦味酸溶液,(三)设备水浴锅滤纸,漏斗吸管试管及试管架玻棒四、实验步骤:(一)蛋白质的可逆沉淀蛋白质的盐析过滤2ml蛋白质浓溶液等体积饱和浓硫酸溶液沉淀清夜硫酸铵粉末沉淀加水观察现象(二)。取支试管,加入蛋白质溶液,加入,再加***银溶液滴、乙酸铅滴和硫酸铜滴,振荡试管,观察生成沉淀的颜色和量。放置片刻,倾去上清液,向沉淀中加入少量的水,沉淀是否溶解?为什么?