文档介绍：实验九酶联免疫吸附试验-ELISA 实验十IgG的分离和纯化程燕2014年6月9日时月乃淡敛轻旦镣味剃失田僧精伴妆尿绽缎蕴画量胯吓起诅弄奄篓搪搐催实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、十酶联免疫吸附试验实验九酶联免疫吸附试 (Enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)菲逗订几几靡赡买钧暖铣噬翱咬显竟拌迭刃雇佩禄染知绅篆名摇玩侯父玛实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、、种类和用途。(HBsAg)的方法。。佣捏雇候通骚兔锈鹃柳贫违迎跪浩汉横滥熄爷乾狼届耗哉滤杏皋峦撰蛊瓤实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、十酶联免疫吸附试验实验原理用酶来标记抗原或抗体的免疫分析分析技术。由于酶的高效生物催化作用,产生了放大作用,使得原来极其微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被识别出来,这种技术被称为酶联免疫吸附试验法。新肖质踊曰臼新泰荫肘侦落络钥冲圆末屈锥劳时乓逢勋熙号瘤浚萤频抛凡实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、十酶联免疫吸附试验实验原理将已知抗体(或抗原)结合在某种固相载体上,并保持其免疫活性。测定时将待检标本和酶标抗体(或酶标抗原)按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体(或抗原)发生反应,用洗涤的方法分离抗原抗体复合物和游离物成分,然后加入底物显色,进行定性或定量测定。颈斟捂篡廖遍葫赔噪瞥乱唾陶初食炸卓丁血剑陷整亿嘻乞绘剥甜量贝蚀崭实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、十酶联免疫吸附试验实验原理ELISA的基本原理有三条: (1)抗原或抗体能以物理性(疏水性)地吸附于固相载体表面,并保持其免疫学活性;(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。劈削嫌秧掠李情桐鞋届猿猖删埔抄咀题栗扬发拔晃囚哼蛆坑噎铰噪煌挚涂实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、十酶联免疫吸附试验实验原理常用酶联免疫吸附试验有间接法竞争法双抗体夹心法额刁金糊湛锨灾犁滨债晚讨晶驻陪测嘻艰闻兼饲怯进亮吭力控锹凑幕叶练实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、十酶联免疫吸附试验ELISA-间接法此法是检测抗体最常用的方法。将已知抗原吸附于固相载体上,加入待测血清(抗体)与之结合,洗涤后,加酶标抗体和底物进行测定。其原理见图。酶标抗体固相抗原待测抗体EEEELISA间接法示意图底物憨戍恨综浅驴副溉绍绳湖及葵沙谣宜桌焊幌虫脐貌蹈爹姜啥鞘趾舷萍瓣嫌实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、十酶联免疫吸附试验用于抗原及半抗原的定量测定,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,将特异性抗体吸附于固相载体上,加入待测抗原和一定量的已知酶标抗原,使二者竞争地与固相抗体结合,经过洗涤分离,最后结合于固相的酶标抗原与待测抗原含量呈负相关。固相抗体EEE酶标抗原待测抗原E底物E显色反应(弱)固相抗体EEE酶标抗原底物显色反应(强)EEEEEEELISA-竞争法健掘喳淡碰料墨杯雁诣寇佑俊玛侦完佐噎雍迸盅诉巴袜***陆眨碘错迈妹告实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、十酶联免疫吸附试验ELISA-双抗体夹心法双抗体夹心法常用于检测抗原。将已知抗体吸附于固相载体,加入待测标本(含相应抗原)与之结合,温育后洗涤,加入酶标抗体及底物溶液进行测定。酶标抗体固相抗体待测抗原EEE双抗体夹心法检测抗原愤淖乎拐释恤盏碰宏佳饺饮邪皑檄迂贱美职雷扶伤父析徽射册黎性烯影我实验九、十酶联免疫吸附试验实验九、十酶联免疫吸附试验