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蛋酩舒向峦牵蠢,雪
用化学工业年
用蛋白酶蛋白质工程技术改进,
洗涤剂用酶的进展/

、中国科技走学生物系越, 雹一堡一
嫡要为适应洗涤莉用酶的迅速发展,
后获得了县有挽氧化高热稳定性强耐碱性的突变体酶的改良菌种。

.
, 期惋呐
.
早在年就发现蛋白酶有助洗性和热稳定性,以满足市场的需求。年代
去污作用, 但碱性蛋白酶大规模应用于洗涤的遗传工程和年代的蛋白质工程的迅速发
剂工业还是最近三十多年的事。由于加酶洗展,特别是以枯草杆菌蛋白酶为模型的蛋白
涤剂具有洗涤时间短去污能力强,除去血质工程骄究已取得了令人瞩目的成就,
污汗渍特别有效等特点, 因而自年代由荷已有可能为洗涤剂工业提供新型的蛋白酶。
兰人首先试制成功以来, 在西欧、美国、日抗氧化性
本加酶洗涤剂得到了很大发展。据统计, 在当夸洗涤剂工业中所甩的蛋白酶几乎全
日本重垢型洗衣粉几乎全都是加酶产品,美部是来源于芽胞杆菌的胞外碱性蛋白酶
国洗衣粉加酶的占, 液体洗涤剂加酶的, ·· ·
。该酶对氧化剂
占。预计随着酶性能的改进, 美国在敏感, 在. 溶液中, .分钟后
—年内加酶洗涤剂将占。目前欧洲加仅保留的活力,这
酶洗涤剂占。我国从年开始推一特性限制了在漂白洗涤剂中的
广使用加酶洗涤剂, 年加酶洗涤剂已上应用。的活性中心由组氨
升到洗涤剂总量的年我国加酶洗酸一,门冬氨酸一及丝氨酸一构
涤齐产量为—万吨,。洗涤剂工业成, 紧靠活性中心丝氨酸残基的是甲硫
本身也在发展, 漂白、消毒洗涤剂相继问氨酸~。的氧化失括主
世。欧洲的洗涤剂中加有漂白剂, 美国要是甲硫氨酸一侧链氧化成亚砜的结
到年代漂白洗涤剂将占洗涤荆总量的果。。年.·用盒式
% , 日本占总量的,, 且有继续突变的方法将中的甲硫氨
上升的趋势。由于漂白洗涤剂、重碱洗涤剂酸一换成其它氨基酸, 获得多种突变体
和采用热水洗涤均能增强去污力,使原来使酶。甲硫氨酸一半胱氨酸突变体酶比
用的酶已不能适应上述的条件。因此,人们活最高,为原酶的%,甲硫氨酸一
很自然地想到能否用迅速发展的生物拄术来丙氨酸突变体酶比活次之,为。分析其抗
改造原有蛋白酶, 使之具有抗氧化性,耐碱氧化能力如表所示。
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第期日用化学工业
表及其突变体的抗氧化化能力
.

反应对同残留酶活反应时同残留酶活

甲硫氨酸一丙氨酸小时』上小时以上
甲硫氨酸一半脏氨酸分以上分
由表可以看出,甲硫氨
酸一半胱氨酸、甲硫氨酸一÷ 丙
氨酸突变体酶均具有抗氧化性。我们实验室
应用定位诱变的技术对基因
进行了定向改造, 将位编码甲硫
氨酸的密码子改造为编码丙氨酸的密码
子,获得丙氨酸表达
株。我们对该表达株所表达的突变体酶的酶
学性质进行了分析,发现丙氨酸
一具有较低的比活,仅为野生型的,
但同时获得了抗氧化能力。图显示了野生
型和丙氨酸一
对氧化剂:的敏感程度。可以看出,—
.
丙氨酸在分钟内仍能保持
圈野生型和突变型
以上活力在:溶液中野生型—
呻的