文档介绍：实验三蛋白质的性质实验(一) ——(氨基酸)和主要连接方式(肽键)#双缩脲反应1)原理:将尿素加热到180℃,则两分子尿素缩合而成一分子双缩脲,并放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称双缩脲反应。(蛋白质分子中含有许多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。通常可用此反应来定性鉴定蛋白质,也可根据反应产生的颜色在540nm处比色,定量测定蛋白质)。磊惮饭彤耘指命靖翰具僚拽唬胁堰们桓抄衫望淘澡殷奈榔骚狭茫骚寻略脊实验三蛋白质的性质实验实验三蛋白质的性质实验#双缩脲反应2)试剂:(1)尿素(2)10%氢氧化钠溶液(3)1%硫酸铜溶液(4)2%卵清蛋白溶液2%卵清蛋白或新鲜鸡蛋清溶液(蛋清:水=1:9)哉指拥洒燎煮玫盖木先扒腮围淖米寞罐壹院炔箱膳抠迫焉虱昔瓜闸蚂挞榴实验三蛋白质的性质实验实验三蛋白质的性质实验#双缩脲反应3)操作:取少量尿素结晶,放在干燥试管中。用微火加热使尿素熔化,然后停止加热,尿素放出氨,形成双缩脲。冷后,加10%氢氧化化钠溶液10滴,振荡混匀,再加1%硫酸铜溶液2滴,再振荡。观察出现的粉红颜色。要避免添加过量硫酸铜,否则,生成的蓝色氢氧化铜能掩盖粉红色。向另一试管加卵清蛋白溶液约5滴和10%氢氧化钠溶液约10滴,摇匀,再加1%硫酸铜溶液2滴,随加随摇。观察紫玫瑰色的出现。造深绝枚特山隙票末挺悦苛缆锦徐玛婚米皱谗帐涟葫啼陆卉荒沼兰馈秦瘤实验三蛋白质的性质实验实验三蛋白质的性质实验#双缩脲反应4)注意事项:含有一个肽键和一个-CS-NH2,-CH2-NH2,-CRH-NH2等基团的物质以及乙二酰二***等物质也有此反应。因此,一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应,但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。叼阿吸戈鳖赐斩程受料娘闽样愤讥铰把鼻蔗窒承撬禾缺跟均而阑精缝显慢实验三蛋白质的性质实验实验三蛋白质的性质实验#茚三***反应1)原理:在加热条件下,所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽与茚三***反应都产生蓝紫色物质,只有脯氨酸和羟脯氨酸与茚三***反应产生黄色物质。此反应十分灵敏,根据反应所生成的蓝紫色的深浅,进行比色就可测定样品中氨基酸的含量,也可以在分离氨基酸时作为显色剂对氨基酸进行定性或定量分析。苗***粪披戍俐攻擅浸旅伺俯磋差茂逃壁忠妆紫琅旱钠苯蔑蚂唱华拍簧蠕卵实验三蛋白质的性质实验实验三蛋白质的性质实验#茚三***反应2)试剂:(1)2%卵清蛋白(2)%甘氨酸溶液(3)%茚三***-乙醇溶液贵周倡警左站待其嚏竭缩柳简鬃又遭早踪燎姑戮邪饵子凶舔卷牙粒即电荷实验三蛋白质的性质实验实验三蛋白质的性质实验#茚三***反应3)操作:(1)取2支试管分别加入蛋白质溶液和甘氨酸溶液5滴,%茚三***水溶液,混匀,在沸水浴中加热1-2分钟,观察颜色由粉色变紫色再变蓝。(2)%缬氨酸溶液,风干后,%茚三***乙醇溶液,在微火旁烘干显色,观察紫红色斑点的出现。案棵左杭劈改椿瘟忧芯谣姜赞盖储广裁钓勤企既狡人***蝴间怔屈约亮舔沸实验三蛋白质的性质实验实验三蛋白质的性质实验#茚三***反应4)注意事项:β―丙氨酸、氨和许多一级***都呈正反应。因此,虽然蛋白质和氨基酸均有茚三***反应,但能与茚三***呈阳性反应的不一定就是蛋白质或氨基酸。在定性、定量测定中,应严防干扰物存在。此反应的适宜pH为5-7,同一浓度的蛋白质或氨基酸在不同pH条件下的颜色深浅不同,酸度过大时甚至不显色。臀煎凋位养吧跳猛捆董搜为****缀兜妒癸尸敌芭袱尧债糊宵者苔械痰拯油篡实验三蛋白质的性质实验实验三蛋白质的性质实验