文档介绍：高产β-葡萄糖苷酶酿酒酵母的筛选及其特性研究
汇报人:丁吉星

1、引言
2、实验材料和方法
3、实验结果与分析
4、结论
1、引言
酵母菌是葡萄酒酿造中重要的微生物,从葡萄品种原产地的环境中可以筛选出充分展现该地域特色的酵母,并酿出风格独特、具有品种典型性的葡萄酒。
优质葡萄酒需要具有产区特征、能够体现葡萄酒特色和风格的优良酵母菌株,因为酵母所产β-葡萄糖苷酶可以分解香气前体物质,增加葡萄酒香气的复杂性。
然而在目前,我国在葡萄酒酵母的研究和利用方面还处于起步阶段。因此,筛选具有我国产地特色的高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株对我国葡萄酒的生产具有重要的意义。
2、实验材料和方法

新疆鄯善、河北昌黎、河北沙城、山东烟台、宁夏贺兰山、吉林通化、甘肃银川7个地区的酿酒酵母作为出发菌株, VL1作为工业对照菌株。

YPDL 、YEPD、筛选培养基、发酵培养基

对-硝基苯基-β-葡萄糖苷酶(p-NPG)、对硝基苯酚(p-NP)、葡萄糖、酵母浸粉、蛋白胨、琼脂、柠檬酸、乙醇、酒石酸、苹果酸、醋酸、硫酸钾、硫酸镁、考马斯亮兰、牛血清蛋白、碳酸钠、亚硫酸、无水乙醇、磷酸氢二钠、氯化钾、氯化钠、氯化钙、氯化亚铁、硫酸镁、硫酸锰、EDTA等
主要仪器
UV-1700紫外分光光度计、pHS-3C型精密pH计、冷藏箱、MJ-250B型霉菌培养箱、101-2A型电热鼓风干燥箱、电热恒温水浴箱、 SS325高速蒸汽灭菌锅、RC5C高速冷冻离心机
2、实验材料和方法

(实验材料中的菌株)
高产β-葡萄糖苷酶酿酒酵母菌株的初步筛选
碳酸钠显色反应初选,p-NPG法测酶活性复选
酵母产β-葡萄糖苷酶的条件的优化
pH值、温度、酒精度、葡萄糖、培养时间
-葡萄糖苷酶活性的因素
温度、pH值、金属离子、胞内酶和胞外酶
初筛菌株的发酵特性研究
发酵力、耐低温、耐SO2、耐酒精
2、实验材料和方法
数据统计分析
每个处理进行三次重复,取其平均值进行分析,实验数据用DPS数据分析和进行方差分析
3、结果与分析
-葡萄糖苷酶酵母的筛选
对实验所用120株酵母进行初步筛选,挑选出32株高产酵母,进入下一轮进行定量分析(酵母产的β-葡萄糖苷酶)筛选,最终筛选出NE-8和NX-9。
3、结果与分析
影响酵母产β-葡萄糖苷酶的条件
pH值对酵母产酶的影响
NE-8酵母所产酶活性最大时最适pH=,而VL1和NX-。
3、结果与分析
影响酵母产β-葡萄糖苷酶的条件
温度对酵母产酶的影响
NE-8产β-葡萄糖苷酶的最适温度是40℃,VL1和NX-9为30℃,相比NE-8,更适用于葡萄酒工业生产的温度。
3、结果与分析
影响酵母产β-葡萄糖苷酶的条件
酒精度对产β-糖苷酶的抑制作用
对于VL1和NX-9在酒精度超过8%时酶活性明显降低,降低至30%,在酒精度为20%时,酶活性几乎为零。但是对于酵母NE-8,随着酒精度的增加酶活性反而上升。