文档介绍：完成实验
酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?
提出问题
作出假设
设计实验
分析结果,得出结论
变量如何控制?
探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
该探究活动中涉及4个科学方法:
(1)数学模型法;
(2)抽样检测法;
(3)显微观察法;
(4)微生物培养法。
探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
关注本实验中的几个关键点:
酵母菌的计数
利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数法,也叫做显微镜直接计数法。
优点:直观、快速。
适用于稀释的菌悬液(或孢子悬液),即液体培养基中菌体的计数。
此法计得的是活菌体和死菌体的总和,又称为总菌计数法。
酵母菌的计数
(1)计数工具——血球计数板
实物图
正面图
侧面图
计数室
滴液处
血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。
计数时,常采用样方法。
探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
25个中格
16个小格
16个中格
25个小格
25X16 = 400小格
16X25 = 400小格
每个计数室(大方格)共有400小格,
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抽样检测:
5×16=80个小格
抽样检测:
4×25=100个小格
酵母菌的计数
(2)计算:
每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少?
探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
酵母细胞个数/mL=
所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数
所数的小方格数
例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行, ,由400个小方格组成。现对某一样液进行检测,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先        后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有          个。
例1 :在用血球计数板(2mm×2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内()酵母菌平均数为16,据此估算10mL培养液中有酵母菌      个。
2x107
2×108
稀释
例3  检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成, mm3。
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻   个/mL。
5n×105
(3)计数的操作
稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释;若菌液不浓,可不必稀释。
镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需清洗后才能进行计数。
加样品:在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴(将计数室充满即可),让菌液沿缝隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。
探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
(3)计数的操作
显微计数:静止5分钟后,先用低倍镜(16×10)找到计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格,每个计数室选取5个(或4个)中方格中的菌体进行计数。每个小方格内约有5-10个菌体为宜。对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。
探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
(4)血球计数板的清洗:
使用完毕后,将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗,切勿用硬刷洗刷,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检,观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复洗涤至干净为止。
探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化