文档介绍：荧光定量PCR反应体系配制
原液
1 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5
每管预先加入90μl 超纯水
10μl
10μl
10μl
10μl
10μl
模板梯度稀释
反应体系如下:
蒸馏水
SYBR® Green Realtime
PCR Master Mix
341F(50ng/μl ) 1μl 7μl
783R(50ng/μl ) 1μl 7μl
样品溶液 2μl 分别加
Total 25μl
1个体系
7个体系
反应程序:
94℃ 1分钟
94℃ 30秒
55℃ 30秒
72℃ 30秒
72℃ 5分钟
40个循环
72℃到95℃, ℃,检测一次荧光信号,绘制熔解曲线
注意事项:
反应体系在冰上配制
体系配制过程中带塑料手套操作,手不要触碰PCR管