文档介绍：病理诊断技术
南京农业大学动物医学院
动物病理学科
一、病理切片制作技术
二、病理组织诊断技术
病理切片制作技术
第一章组织的取材和固定方法
第二章组织切片技术
第三章苏木精-伊红染色方法
第一章组织的取材和固定方法
病理标本的检查应包括大体和显微镜下观察二个方面,而正确的诊断往往取决于准确的显微镜下观察,因此,制片质量的好坏将直接影响诊断结果的准确性,甚至会带来错误的结果。
近年来,免疫组织化学方法在病理学上应用越来越广泛,对取材的要求也越来越高,不仅要求组织细胞的形态保存完整,而且要求最大程度的保存组织或细胞成分的抗原性。抗原性不受损伤是一方面,还要求不能弥散,否则,对于抗原含量较少的标本,抗原性完全丧失,产生假阳性结果,影响病理诊断的准确性,甚至抗原的定位也无从谈起。
第一节取材
从大体标本上按照病理检查的目的和要求切取适当大小的组织块,供制片进行显微镜检查。
一、取材时对送检组织的要求
二、取材
三、取材时的注意事项
四、冰冻切片取材
一、取材时对送检组织的要求
送检组织切取后应立即放入10%福尔马林溶液内固定;
尸检标本应争取在死亡后尽可能短的时间内取材;
有特殊要求(如细菌培养、结石的化学成分分析等)须事先联系,在标本未固定前进行处理。
二、取材
对送检组织应进行详细检查,根据诊断的需要,确定取材的部位和块数;
切取的组织要按不同部位分别给予不同的编号或标记,以便镜检时查对。
三、取材时的注意事项
***应锋利、薄;切取组织块时,避免前后拉动或用力挤压组织,避免使用有齿镊,引起组织结构的变形和损伤。
cm cm - cm 为宜。
。
。如皮肤组织的包埋面应与表面垂直,才能保证皮肤的各层结构都能被观察到。
(如穿刺材料等)常常用易透水的薄纸包好,在取材时将标本染上伊红液,以免包埋过程中丢失。
,组织块上如有血液、粘液、粪便等污物,应先用水冲洗干净再取材。
,原则上是凡是可疑处均应取材。一般来讲,除了病变的主体部分外,应注意切取病变组织和正常组织交界处。
,否则会对以后的切片和观察带来一定的影响。
,应核对无误,并签署有关信息和记录日期。
,标本应按序存放,并加足固定液以备复查。
四、冰冻切片取材
(一)取材
  在详细检查的基础上选取最有代表性的组织,必要时应取2块或更多组织块。取材后应立即用液氮速冻,然后在-70℃或-40℃低温冰箱保存。
 
(二)注意事项
  ,标本盒不能直接浸入液氮,以免组织膨胀破碎。
-10℃冰箱内缓慢冷却,否则组织内水分可逐渐析出形成冰晶,造成组织结构破坏。
,防止脱水。
,应在37℃加温速融,自然复温将造成组织结构破坏。
第二节固定方法
将组织浸入某些化学试剂,使细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置,这一过程称为固定。凡需病理检验的各种组织都需经过固定。
一、固定的意义
二、固定方法的选择
三、固定液