医学免疫学CDC实验报告.docx

文档介绍：:..CDC实验一•实验原理细胞表面抗原与相应的抗体(IgGl〜3或IgM)特界性结合形成的免疫复合物,口J通过经典途径激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。因此,水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞,染成蓝色,为阳性反应;不带抗原的细胞,未损伤,不染色,为阴性反应。•胸腺细胞悬液制备颈椎脱臼法处死小鼠I暴露胸腔,分离岀胸腺I银了夹住胸腺反复轻轻研磨I单个细胞PBS洗2次,lOOOrpm,lOminI加入5%小牛血清PBS制备细胞悬液调节细胞浓度至3-4X10刀ml第一组第一组第三组第四组试剂LC+als+cLC+alsLC+cLCLC(p1)50505050ALS(m1)5050PBS(ui)505037°C孵育30minC(P1)100100PBS(ui)10010037°C孵育30min三•结果判断①细胞膜穿孔的细胞呈蓝色,细胞膜完整的活细胞不着色。②细胞毒性作川的判断标准如下:阴性反应(一)死细胞山0・10%可疑阳性反应(土)死细胞占11・2()%弱阳性反应(+)死细胞占21-50%阳性反应(++)死细胞占51-80%强阳性反应(+++)死细胞占81-100%四•(LC+ALS+C)(LC+ALS)(LC+C)(LC)+++———2•照片展示五•讨论①•第①组成阳性的原因:实验中加入抗原、抗体、补体、LCo抗原抗体能形成抗原抗体免疫复合物,通过经典途径激活补体,形成攻膜复合物,从而导致细胞膜穿孔,细胞受损,台盼蓝进入细胞,染成蓝色,呈阳性反应。说明CDC实验必须要有抗原、抗体、补体共同参与。②•第②