第二章分子克隆(5).ppt

文档介绍：基因工程icEngineering李黄金Email:lihuangjin@生命科学与生物制药学院2009基因工程课程内容523416789基因工程概论分子克隆单元操作大肠杆菌基因工程非肠道细菌基因工程真菌基因工程昆虫基因工程高等动物基因工程高等植物基因工程蛋白质工程、(切与接)(转与增)转化子的筛选与重组子的鉴定(检)、用于基因转移的受体(宿主)二、、用于基因转移的受体(宿主)受体(宿主)应具备的条件各种基因工程受体的特性实验室常用的基因工程受体基因工程主要宿主系统原核细胞(Prokaryotic)真菌(Fungus)昆虫(Baculovirus)高等真核细胞(Eukaryotic)人(基因治疗)动、植物(基因农场)二、转化和扩增(转与增)pentent):受体(宿主)细胞经过一些理化或生物学方法处理后,细胞膜的通透性发生暂时性的改变,成为能允许外源DNA进入的一种生理状态。pententcell)转化(transformation):外源DNA导入特定受体(宿主)细胞,并使之繁殖和表达的操作。转化子(transformant):经转化而带有外源DNA的受体(宿主)细胞。重组子(binant):含有重组DNA的转化子。相对于仅含空载体的转化子而言。1、转化的原理与技术Ca2+诱导的完整细菌细胞的转化(Ca2+法)细菌原生质体的转化(原生质体法)完整细菌细胞的电穿孔转化(电转化法)l噬菌体DNA的转染