文档介绍：手足口病的实验诊断
安徽省疾病预防控制中心
2009 . 3 . 11
手足口病的病原
手足口病(hand-foot-mouth disease, HFMD)由人肠道病毒感染引起。
人肠道病毒为小RNA病毒科(Picornaviridae),肠道病毒属(Enterovirus)的一组单股正链RNA病毒。其中包括埃可病毒(31个血清型)、柯萨奇病毒A组(23个血清型)和B组(5个血清型),还包括3个脊髓灰质炎病毒血清型和人肠道病毒68-71型。
Courtesy of Linda M. Stannard, University of Cape Town,
~30nm
二十面体对称
无包膜
人肠道病毒的毒粒结构
人肠道病毒发现的历史
脊髓灰质炎病毒:1909年首次鉴定出该病毒,1949年,利用细胞培养的方法增殖病毒,为疫苗的研制奠定了基础。
柯萨奇病毒:1948年在美国纽约Coxsackie镇,将两名麻痹患儿的标本接种至乳鼠体内,分离出来的一组病毒定名为柯萨奇病毒。根据它们在乳鼠上产生的组织病理学变化和在细胞培养上的能力,分为柯萨奇病毒A组和B组。
埃可病毒:1951年在一名无症状的儿童的粪便标本中分离到,在细胞培养上可以造成致细胞病变,但对乳鼠和灵长类动物不致病。
新肠道病毒:随后新发现的病毒被按照序号命名(69~71),最近,已经命名至102型
肠道病毒主要血清型
手足口病的常见致病病原
多种肠道病毒都可引起HFMD,主要为:
柯萨奇病毒A组的4~7、9、10、16型
B组的1~3、5型
埃可病毒的部分血清型
肠道病毒71型
最常见的为CV-A16和EV71
肠道病毒的抵抗力
肠道病毒无包膜,乙醚、75%酒精、表面活性剂等均不能将其灭活。
对紫外线及干燥敏感;各种氧化剂(高锰酸钾、漂白粉等)、甲醛或56℃ 30min都能灭活病毒
病毒在4℃可存活1年,-20℃可长期保持感染性
病毒RNA有感染性。
(一)粪便标本
采集病人发病7日内的粪便标本,用于病原检测。粪便标本采集量5~8g/份,采集后立即放入无菌采便管内,4℃暂存立即(12h内)送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(二)脑脊液标本
出现神经系统症状的病例,要采集脑脊液标本,进行病原和抗体检测。采集时间为出现神经系统症状后3日内,~。采集后立即装入无菌带垫圈的冻存管中,4℃暂存立即(12h内)送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
手足口病的标本采集
手足口病的标本采集
(三)血清标本
采集急性期(发病0~5天)和恢复期(发病14~30天)双份配对血清用于抗体检测。检测IgM时,采集(发病7~20天)血。静脉采集3~5ml全血,置于真空无菌采血管中,自凝后,分离血清,将血清置于-20℃以下冰箱中冷冻保存。
(四)咽拭子标本
采集病人发病3日内的咽拭子标本,用于病原检测。用专用采样棉签,适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位,应避免触及舌部;迅速将棉签放入装有3~5ml保存液(细胞维持液)的采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,4℃暂存立即(12h内)送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(五)疱疹液
可同时采集多个疱疹作为一份标本,用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅速将棉签放入内装有3~5ml保存液(维持液或生理盐水)的采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封。所采集标本4℃暂存立即(12h内)送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
手足口病的标本采集