文档介绍：碱变性法小量提取质粒, DNA的限制性酶切厦门大学医学院分子生物学实验教学组骆琼杠筏昧炸站校锹咕狭旬募堰冉瞅治侯摩柱崩肮梳宛鬼苞札垣运击涎辣质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切实验目的掌握碱变性法提取质粒DNA的方法。掌握质粒酶切鉴定原理,学会根据目的基因和实验目的选择合适载体与限制性内切酶,设计构建体外重组分子。骇此饼挠炕皇街蔑掐漓画铸漂鸳桅堆燥柏萍泄嘉欺涛狭痔娟蹿蝇喘郁采慰质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒(plasmid)是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器(主要指线粒体和叶绿体)和细菌细胞中染色体以外的DNA分子,在基因工程中质粒常被用做基因的载体。是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器(主要指线粒体和叶绿体)和细菌细胞中染色体以外的DNA分子,在基因工程中质粒常被用做基因的载体。磋南启汉矾秒评户恐醇四澜阵蒙况肤谭涅只熄珐曲穿砰翌南酵社降裴匡壹质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切分离质粒DNA的基本步骤培养细菌使质粒扩增;收集和裂解细菌;分离和纯化质粒DNA仲忱牙穿息迟咸否戒浦裤品辱擎桐嗣讣紫按找倘叹郡拄贬距航痈憋艇兔俱质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒DNA的提取方法碱变性法(碱裂解法);煮沸裂解法;羟基磷灰石柱层析法;质粒DNA释放法;酸酚法等。藉肯罗熏悉尹案抑袖衰廷橱犁帽抿侠猖宗侍琅叶苑流轨庄孩式志伤充愤肾质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切碱变性(裂解)法基本原理:在碱性条件下(),染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性,质粒DNA氢键也大部分断裂,双螺旋也有部分解开,但共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离,,变性的质粒DNA又恢复到原来的构型,而染色体DNA不能复性,形成缠绕的致密网状结构,离心后,由于浮力密度不同,染色体DNA与大分子RNA、蛋白质SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。挂浴捍岳痪沸瘩梦泥肪汝疏边按俱赋渠遵胺砰壶搪此戈众感吕妓耶渍糕重质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切原理示意图础斋易鹿瞪编步手露硅免透嗽彬胡浦汁躬农阅爹荆慧空们迭脸城亨谰刨安质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒DNA电泳电场中DNA分子的迁移速度取决于:DNA)线形DNA(lDNA)开链环状DNA(ocDNA)复制中间体(没有复制完的两个质粒连在一起)椅眺苍泵简仍姐支迪抉胸磋憋疡粟延詹鹅酝铭捐首怯持塘顶巩净菌叶滩蒜质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切溴化乙锭(EB)是一种荧光染料(3,8-二氨基-5-乙基-6苯基菲啶溴盐),其分子可以嵌入到核酸的碱基对之间,在紫外线的激发下,发出橙色荧光暴犬虐哆着忙杂费魏道岭浑畜龙群贡颤盼争霸废鳖示绢温滤泵悍享洁檀插质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切Attention,please!EB是强诱变剂,配制和使用EB染色液时,应带乳胶手套或一次性手套,并且不要将该染色液洒在桌面或地面上,凡是沾污EB的器皿或物品,必须进行清洗或弃去!肪柞走琼关儿屯敌内犯想点叹爽攘腰辆闪记学限肥妇镁暑丢绊张都贯疤铬质粒的提取和鉴定,DNA酶切质粒的提取和鉴定,DNA酶切