文档介绍：西北大学
硕士学位论文
猪血红蛋白及其戊二醛聚合猪血红蛋白的分离纯化工艺研究
姓名:周勃
申请学位级别:硕士
专业:生物化工
指导教师:边六交
20080615
摘要3繬赐岩築:鵓儿撼逡築:ⅡⅡ儿本论文主要研究高纯度猪血红蛋白的提取与分离纯化工艺及其戊二醛聚合通过比较等三种常用的阴离子交换剂层析介质对猪血红蛋白的分离纯化效果,选择介质作为猪血红蛋白的分离纯化介质。在此基础上,实验设计了两种工艺路线,工艺路线菏紫扔玫蜕ㄌ崛≈硌:斓鞍祝缓笥贸恕阴离子交换层析和号抛璨阄鋈法分离猪血红蛋白;工艺路线菏紫扔萌让舴ㄌ崛≈硌:斓鞍祝缓笥贸撕阴离子交换层析两步法分离纯化猪血红蛋白。通过比较两种工艺路线,选择工艺路线捶掷氪炕硌:斓鞍住I滋跫#赐液洗脱程序:用缓冲浩胶猓涎撼錋液洗脱,待样品完全流穿,再用缓冲合赐眩幌赐蚜魉傥#.,,检测波长为此方法所纯化的猪血红蛋白经测定浓度为:痙厥章饰#%,以高效凝胶排阻色谱、高效离子交换色谱及甈缬炯觳獯慷染%以上。此工艺具有分离速度快,收率高、操作简单,可线性放大的特点。纯化所得的高纯度猪血红蛋白,按照本实验室已申请的专利方法制备成戊二醛聚合猪血红蛋白后,通过凝胶过滤柱联用多角度激光散射检测其分子量分布范。我们用阴离子交换色谱对其进行分离纯化,色谱条件为:洗脱流速为:/,缓冲液疞,洗脱程序为:,セ撼逡築;~セ撼逡築;~琹%缓冲液4笥遥木厶逖:斓鞍缀量小于ィ锏焦ひ找G蟆关键词:猪血红蛋白;戊二醛聚合猪血红蛋白;离子交换层析;分离;纯化;猪血红蛋白的纯化工艺。。西北大学硕士学位论文、.~
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固勃加吕年∥月压日年∥月膳日月少日学位论文作者签名:阁勃指导教师签名:尘丛三圭砌莎西北大学学位论文独创性声明西北大学学位论文知识产权声明书学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版。本人允许论文被查阅和借阅。本人授权西北大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所等机构将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》或其它相关数据库。保密论文待解密后适用本声明。学位论文作者签名:本人完全了解西北大学关于收集、保存、使用学位论文的规定。本人声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,本论文不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得西北大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。
第一章文献综述煜赴闷费芯扛趴输血对于外科手术、抢险抗灾和战场救护来说是必不可少的医疗手段【俊=年来,全世界对输血用血液的需求量成几何级数增长。但是由于人类血液的血型十分复杂,输血反应始终难以克服,而天然血液的储存和运输又极为困难,再加上约癏Ⅳ等病毒对血液污染严重,献血人员数量严重不足等众多原因,使得安全有效的血源日益紧缺。因此,红细胞代用品就成为国际关注的研究热点,并被列为二十一世纪的重大研究开发领域。理想的红细胞代用品要求具有天然红细胞的传递氧功能、生物相容性、安全性和稳定性【,即:①具有较高的携氧能力,氧分压在正常生理范围内,能有效向组织供氧;②与人血液所有组分具有良好的生物相容性;⑦能维持血液渗透压、酸碱平衡、粘稠度和血容量;④无免疫原性拗泼粼、无血液病原微生物污染、无热源;迥谘钒胧倨谠以上,在正常灌注条件下不产生肾毒性等副作用;⑥在低温条件下,产品保质期大于鲈拢虎呔哂性て诘目汕宄浴D前研制的红细胞代用品主要可分为基于血红蛋白的各类制品猳螅ê铣傻姆祭嗷衔锪酱罄唷】全氟碳化合物是一种合成的化合物,具有高携氧能力,℃条件下可溶解%.%容积的氧。虽然全氟碳化合物不溶于水,但经表面活性剂乳化即可进行输注。日本大阪绿十字公司生产的%,用于冠状动脉成形术后冠状动脉灌流。全氟碳化合物的高溶氧性对治疗呼吸困难综合症效果显著。但全氟碳化合物所携带的氧会立即释放,难以运载到某些缺氧组织,同时氧会在部分组织中积累引起组织损伤,另外具有储存不便,在体内代谢较慢,存在类似感冒症状的副作用,它的生物相容性和携氧能力均不及血红蛋白,其长期使用的效果和安全性尚未完全有保证,因此其应用具有一定局限性。血红蛋白是生物体内载送氧的生物分