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用于免疫分析的聚苯乙烯微孔板功能化的研究.pdf

上传人:中国课件站 2011/10/14 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:长春理工大学硕士学位论文
姓名:苏赛飞申请学位级别:硕士
专业:应用化学指导教师:董相廷;潘利华
20080401
摘耍为满足嗣相时悯分辨荧光免痰分擀芯啃枰#捎寐独υ靥逭际跹露鲇杷蟛庀低尘暇坶蚁┗真輐投,不仅提衰低耻擦槊粢撸申倏社灏迅眉术应用到其他免疫分析技术、生物芯片技术、污水处理、发酵工艺、酶工程和亲和层本文姆聚苯乙烯徽魏薮内褒骚潮鞠秘麓化,鹾裁一葶孛强蒙苯乙爝徽孔投蠹表嚣形成芮克帷⑶考睢⒂谢芗恋娜掏谝膜层,辩在膜层表鼷烷基他得到灞性基团与己二酸二髋肼进行“手臂”连接,用双功能基翻戊二醛活化,活化后的膜艨与鬣自质具有缀裹熬连接链熬巍稳定性。检测籀浆表鞠,缀螃馋於聚笨乙烯徽魏扳熊学连接蛋是震结会察魄臻瑾蔽瓣楚邕纾榱璐娌令秀活犍簿低冷警%。灵敏度和稳定性显著提藤。本文耧器瓣麓麓纯聚苯己烯微强缀其宥搜藤方法麓使、快捷、污染小、成本低的特点,有广阔的陂爝前景。关键词:聚荤乙烯微咒板:恳娥一蝗ο喙Φ寤煌檎羲柝,具裔藿要的现实意义。
赵絣簆:,琭.,瑃盿”.辐%。瓵,,瑂,;籹—籥畃琲。
指导导师簸名雄醚年二月尘日终蛰豢褒:拧照年—臁I瓣虢丛纺甓峦陵捻者∈溪王大学学位谂文舨毂使鼹授权书长春理工大学硕士学位论文原创性声明零久郑藿声鞠;掰黧交的颟±学位谂文,《翅子免疫分辑静聚苯氛爨徽琵板秘熬强弱磷究》楚零人在攘罨教烬豹攒导下,独立避行磷究工作所鼗褥瓣袋巢。豫文中已经凌臻零堑屙ú凸铮沮盼牟话莩涛栎は飧鋈腌毙荀囊丫⒈碛蛄缅鞴炯鲻蜗防场6本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意谈到本声翻豹浚律结果由本人承抠。笨学位诡变俸毒爱撵导彀龄宽垒了瓣“长春理工大学黼士、辩士学整论文叛较键嚣裁定”,弱意长毒理工夫攀绦鬻莽离游窳毒荚郡旯醪笏涂碥凹畚穆锤创恰孔H跗怯璞郑然迓畚谋灰嘉璋越杪骸7預攫毂长春囊王太学颦豁将本学位论文的全部或部分内释蹁入有燕数据库进行捻索,也可袋用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。
⋯免疫实验;而将尼龙移植到聚苯乙烯表面的研究报告不多”黾难芯勘ǜ嬉第一章绪论§引言&#167免疫分析技术研究现状在临床检验和生物学研究中普遍采用的酶联免疫分析约敖攴⒄的非放射性免疫分析,如荧光免疫分析⒎⒐饷庖叻治乙⑹奔浞直婷庖分析鹊姆椒ㄑа芯恳恢痹谧非笊锎蠓肿佑牍滔嗖牧系幕Ч布劢岷希坏附到固相表面。由于吸附后生物大分子容易失活,在操作过程中有容易脱落,导致起灵敏度,重复性及稳定性降低。为解决此问题,必需使生物分子与固相形成牢固、稳析的固相材料,聚苯乙烯微孔板外露的都是稳定的碳氢键,其化学改性或功能化有相当难度;功能化研究一般采用化学改性、构建功能基团“羽被Ⅳ然土蚯饣,有关多胺应用的研究多数集中于将尼龙膜作固相材料,做尼龙膜印证实验或多氨凝固剂,使多胺均匀、牢固移植于聚苯乙烯表面,形成白色反光味喟坊诓悖基的活性,且稳定性高,成本低,具有商品化实用价值。标记免疫分析技术是一大类超灵敏度,高特异性检测技术的总称,因其具有许多直到目前实际采用的仍然是以前的物理吸附,即通过物理吸附作用将生物活性物质吸定的共价键结合。由于聚苯乙烯材料来源容易,理化性能稳定,易于成型,故被应用于免疫分功能团移植或共聚等方法。其中有的方法尚未成熟,有的成本过高,未能普及应用。尼龙层不能耐受酸、碱及有机溶剂,故采用预先与免疫配基结合睁“,再移植微孔表面,没有普遍使用价值。本次实验我们将采用特殊的溶解多氨配方””,并使用特定的聚苯乙烯活化剂,该多胺内表面固相在室温暴露空气中能长期保存并能耐受强酸、碱、有机溶剂不变形、不脱落。经烷基化,联结氨基“手臂”处理和共价键结合抗体,显著提高结合免疫配通过文献检索,本次实验的方法目前国内还未见报道。独特优点,已广泛应用于基础医学和临床各领域。它们的基本原理相同,仅依标记物的不同而最终测量所发出的信号而异。虽然文献报告的方法已有余种,但有搀厂。应用价值或已被广泛应用的主要有:放射免疫分析际酢⒚该庖弑昙欠治鰂技术、化学发光免疫分析技术、荧光免疫分析技术褪蔽史直嬗ü饷疫分析际醯取R訤就这上址治黾际醯难芯肯肿春蚫口景进行洋细的比较介
放射免疫分析技术是利用放射性核素或其他标记物作为示踪剂,在生物体内或体获年度诺贝尔医学奖。该技术方法将检测放射活性的高灵敏度与抗体、抗原反应的特异性得以巧妙结合,因此具有极高的灵敏度乙一一/,可以分析许多极低浓度的生物活性物质。其技术分析方法可以分为以下几种:、怨芄滔喾在抗原、抗体免疫反应完成后不必加分离剂和低温离心程序,只需测量管的放射性便可得出待测物浓度,操作简便快速,适合大量临床样品的检测。尤其以洗涤代替分离和离心,降低了非特异性结合,提高了方法精密度和准确性。烯管进行活化,以共价键结合包被,提高了包被的牢固性、均一性和蛋白质的量。但联剂处理试管,类似共价键