文档介绍：德国小蠊 Bla g 2 特异性抗原的定位研究
(生命科学学院生物技术专业赵偲竹)
(学号:2001302041)
摘要:研究目的探讨过敏性疾病主要变应原德国小蠊 Bla g2 特异性抗原的定位。方法
在本室克隆,表达和纯化出 Bla g2 纯化的基础上,按常规方法免疫小鼠,分离血清(一抗),选
用抗鼠 IgG 荧光抗体为二抗,德国小蠊经石蜡切片,在光镜下对其内部结构和特异性变应原的定
位进行观察。结果免疫荧光显示德国小蠊主要变应原(Bla g2)定位于蟑螂的肠组织及肠内
容物,而蟑螂的生殖、排泄系统等脏器均呈阴性反应。结论德国小蠊 II 类变应原存在于蟑螂
的肠内容物和粪便中,对进一步进行德国小蠊特异性抗原的分离、纯化及疫苗的研究提供了理论
参考。
关键词: 德国小蠊(Blattella Germanica);HE 染色;主要变应原 Bla g 2;荧光抗原
定位;FISH
教师点评:该论文设计合理,方法选择正确,结果可信,为进一步对德国小蠊特异性抗原的
分离、纯化奠定了有益的理论基础。该课题运用 HE 染色和荧光抗原定位对德国小蠊的特异性抗
原定位进行了研究,并制作出了德国小蠊染色体标本,为进一步荧光原位杂交打下了良好的基础。
结果表明德国小蠊主要抗原定位于肠道及其内容物,如粪便等。该论文体现了作者已具备较为扎
实的基本理论知识和熟练的实验技能,其论文是一篇优秀的本科生毕业论文,并获得广东省大学
生挑战杯特等奖。(点评教师:刘志刚教授)
前言
变态反应性疾病(过敏性疾病)是一种临床上的常见病和多发病,它包括过敏性哮喘、过
敏性鼻炎、过敏性皮炎及过敏性结膜炎,严重影响患者的身心健康和生活质量,并有逐年增多
的趋势,因此越来越受到世界各国卫生组织的关注[2]。变态反应性疾病被世界卫生组织(WHO)
认为是当前世界性的重大卫生学问题,随着人们生活方式的变化和环境污染,变态反应性疾病
的发病率不断上升[1,2].国外从事变态反应性疾病的研究已有一百年的历史,自 1889 年英国医生
John Bostock 首先提出花粉症(Polinosis)以及 1906 年奥地利儿科医师 Lemens Von Pirquet 首先
提出变态反应以来,世界各国科技工作者对当地变应原作了大量研究工作,并且对一系列变应
原进行了不同程度的分析和纯化,在世界卫生组织的倡导下,现已成了 WHO 抗原标准化委员
会以及国际变应原标准化理事等组织。
自 Bernton [ 3 ] 于 1964 年通过皮试和支气管激发试验(BPT)发现纽约 45%的哮喘患者对蟑螂
变应原过敏从而首次报道了蟑螂是引起 I 型变态反应的一种重要变应原后,国内外学者对蟑螂
和变态反应性疾病(如外源性哮喘等)的关系作了深入而广泛的研究,认为蟑螂可通过排泄物、
虫卵、皮屑等经吸入、接触,甚至食入等途径侵入机体引发哮喘,是仅次于屋尘和尘螨变应原
皮试阳性率的主要室内变应原,居第三位,并建议在脱敏计划中应充分考虑蟑螂的因素。国外
有关学者在对德国小蠊变应原进行抗原分析、纯化等工作的基础上,制备了变应原提取液用于
临床特异性诊断和免疫治疗,取得一定的疗效[9、10]。
蟑螂(cockroach)又称蜚蠊,属节肢动物门、昆虫纲、蜚蠊目,是一种全球性分布广泛的
医学昆虫,由于受地理位置及环境因素的影响,蟑螂种类及特性存在很大差异,在室内常见的
种类有美洲大蠊(a americana)、德国小蠊(Blattella germanica)、亚洲小蠊
(Blattella asahinai)、东方小蠊(Blatta orientalis)、凹缘大蠊(a emarginata)、
澳洲大蠊(a austratasiae)、黑胸大蠊(a Fuliginosa)、中华地鳖
1
(Eupolyphage Sinensis)、日本大蠊(a japonica)。在上述种群中美洲大蠊、德
国小蠊、黑胸大蠊、澳洲大蠊等是最常见的种群,各在一些地区形成优势种群,如在法国等欧
洲国家以德国小蠊为主,而美国、巴西等美洲国家以及日本、我国台湾等国家和地区以美洲大
蠊居多,我国南方的蟑螂种类主要是美洲大蠊和德国小蠊,其中美洲大蠊占 70%为优势种群[4]。
德国小蠊Blattella gemanica (姬蠊科Phyllodromiidae)是在世界分布极广,是室内蜚蠊优势种。
也是我国室内常见蜚蠊之一。若虫与成虫有相同的习性。它们白天躲藏在温暖潮湿和黑暗的隐
蔽场所,夜间出来寻找食物、水和进行交配,如果白天看到德国小蠊,说明它们的群体可能很大而
能藏身的缝隙已经虫满为患或食物和湿度不