文档介绍：雨生红球藻 crtO 基因在大肠杆菌中的表达
生命科学学院生物技术专业包厚甲
学号:2002302056

【摘要】通过酶切和 PCR 扩增技术,从 crtO-T 质粒中获得 crtO 基因(873bp)和部分
crtO 片段(603bp),再分别克隆到 pET-28a 和 pGEX-4T-3 载体的多克隆位点,构建表达载体
pET-crtO 和 pGEX-crtO,并进行转基因重组菌株分子检测和目的蛋白的诱导表达。结果表明,
crtO 基因和其部分片段序列都已转入大肠杆菌,得到了相应的重组菌株,但在 SDS-PAGE 电
泳图中,没有发现相应的目的条带,可能的原因包括:crtO 基因序列本身或在构建过程中
发生了突变,形成了大肠杆菌终止密码;基因中可能有细菌不常用的密码子。进一步的分析
正在进行中。
【关键词】虾青素;雨生红球藻;crtO 基因;基因克隆
【教师点评】该论文探讨了雨生红球藻 crtO 基因在大肠杆菌原核表达系统中诱导表达的
可能性,构建了 crtO 基因的原核表达载体,并完成了遗传转化和转基因大肠杆菌的筛选与
分子检测。尽管没有诱导出表达产物,但通过该研究为进一步了解 crtO 的结构和功能、表
达过程中可能出现的问题等有了较深的认识。该同学通过该研究工作,掌握了基因克隆和基
因工程的基本原理和方法,了解了科研设计、操作和结果分析的思维方法。论文设计基本合
理、写作规范,达到了本科毕业论文的要求。
指导老师:胡章立教授
us pluvialis CrtO Gene
Express in System
【Abstract】
The crtO gene(873bp) and crtO fragments(603bp) were obtained by PCR and Restriction
endonuclease digestion. The expression vectors pET-crtO and pGEX-crtO were constructed by
inserting crtO gene and crtO fragments into pET-28a 和 pGEX-4T-3 vectors, respectively. Then,
they were transformed into . The transgenic was further confirmed by molecular
analysis and IPTG was added to induce crtO expressing. The results showed that 873bp and 603bp
of crtO were introduced into , The corresponding transgenic were obtained. However,
no corresponding protein was observed by SDS-PAGE analysis. The possible reason included:
Gene mutation of crtO gene sequence itself occurred, which caused ’s terminator; There
were some condones that were monly used in . Further analysis is under way.
【Key Words】astaxanthin ; us pluvialis ; β-carotene ketolase ; Gene Clone

1 前言
虾青素(astaxanthin)化学名称为 3,3’-二羟基—4,4’-二酮基-β,β’-胡萝卜
素,分子式为 C4OH52O14,广泛存在于生物界中,特别是水产动物的虾、蟹、鱼和鸟类的羽毛
中。虾青素是动物界中分布最广泛的一种叶黄素,呈粉红色,具有强大的抗氧化活性,被称
为“超级维生素 E”。同时,虾青素还具有增强免疫力,抗癌症,防止皮肤衰老,维护眼睛
及中枢神经系统健康等多种生理功能。虾青素最大的市场是水产养殖业和家禽养殖业,不仅
可以改善水生动物及禽类的色泽,还可促进鱼卵受精发育、减少胚胎发育的死亡率,促进个
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体生长、增加成熟速度和繁殖力。此外在保健品、化妆品及医药方面,虾青素强大的生理功
效和广阔的市场前景也引起了国际上的普遍关注。人类和多数动物自身不能合成虾青素,必
须从食物中摄