文档介绍：北京中医药大学学报 2002 年 3 月第 25 卷第 2 期
· 38 · JOurnaI Of Bei ing University Of TCM Marc1 2002,VOI. 25,NO. 2
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软肝化疒徵丸对肝星状细胞活化的影响
杨彦芳! 王绵之" 王煦" 邓平根#
(l 中日友好医院肾内科北京 l00029)
(2 北京中医药大学北京 l00029)
( 南昌市第三医院江西)
" 3 330009
摘要:观察软肝化疒徵丸干预肝纤维化的主要作用机制。分离培养大鼠肝星状细胞(HSC),以软肝化
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疒徵丸灌胃正常大鼠,制备药物血清,温育培养细胞。 H-TdR 掺入法测定细胞增殖,ELISA 法测定
细胞上清型胶原含量, 法观察前胶原( ) 的表达,同位素标记法测定细胞上
! RT-PCR "2 ! mRNA
清间质胶原酶的活性。结果:软肝化疒徵丸药物血清能抑制 HSC 的增殖与胶原蛋白的分泌,提高其
间质胶原酶的活性,抑制其( ) 的表达。结论:软肝化疒徵丸干预肝纤维化的作用机制可
"2 ! mRNA
能在于抑制 HSC 的活化。
关键词:软肝化疒徵丸;肝纤维化;肝星状细胞;大鼠
中图分类号:R285 . 5
软肝化癥丸是现代中医名家王绵之教授治疗慢" 方法
性肝病的经验方,临床资料显示,该方对慢性肝病、 2 . l 正常肝星状细胞的分离培养
肝纤维化有较好的疗效。本实验从软肝化癥丸对肝按文献[2]方法分离培养。
星状细胞活化的影响,探讨该方干预肝纤维化的作 2 . 2 分组及药物血清制备、添加
用机制。共分 3 组,正常血清对照组(对照组)、软肝化癥
! 材料丸血清组(治疗 l 组)、膈下逐瘀汤血清组(治疗 2
l . l 实验动物组)。软肝化癥丸由鳖甲、丹参、当归、白术、香附、清
Wistar 雄性大鼠,体重 450 ~ 500 g,购自上海医半夏等药物组成,膈下逐瘀汤按方剂学五版教材所
科大学实验动物中心。载药物与剂量,两方均由北京市北新桥药店鉴定后
l . 2 主要试剂制成极细粉末。两方分别经 2 次煎煮离心浓缩,前
链蛋白酶、型胶原酶、型酶、鼠尾者制成含生药,后者含生药
# ! DNA ! 0 . 878 g / mL 0 . 459 g /
型胶原及抗小鼠单克隆型胶原抗体等,均为。每组选用正常雄性大鼠只,体重
! Sig- mL Wistar 3 ~ 4
为,治疗、组大鼠灌胃药物次,每
ma 公司产品。羊抗兔 IgG-HRP,华美公司产品。 250 ~ 300 g l 2 2 / d
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氚标胸腺嘧啶( H-TdR),购自上海原子能研究所。次 6 mL / kg(相当于体重 60 kg 成人每日用量的
3 型胶原,美国公司产品。异硫氰倍)。对照组喂以等量生理盐水,连续,至
H! DupOnt-NEN l0 . 8 3 d
第天晚禁食不禁水后,复以灌胃
酸胍,Serve 公司产品。 Tag DNA 聚合酶( Tagase), 3 l2 1 l2 mL / kg
次, 后无菌