文档介绍：山西医科大学
硕士学位论文
垂体腺苷酸环化酶激活肽致大鼠实验性偏头痛
姓名:程娜
申请学位级别:硕士
专业:神经病学
指导教师:牛争平
2011-05-17
山西医科大学硕士学位论文
垂体腺苷酸环化酶激活肽致大鼠实验性偏头痛
摘要
目的:
通过观察 wistar 大鼠尾静脉注射垂体腺苷酸环化酶激活肽 38(PACAP38)后的行为学
变化以及三叉神经核尾核(TNC)部位 c-fos 蛋白的表达情况,探讨 PACAP38 能否作为诱
导剂,诱导大鼠偏头痛发作,以制备新的可靠的实验性偏头痛大鼠模型,并初步探讨
PACAP38 诱导大鼠偏头痛发作的可能机制。
方法:
30 只 wistar 大鼠(250~300g)为研究对象,将其随机分为 5 组,雌雄各半。
空白对照组:大鼠尾静脉注射生理盐水 1ml/kg;硝酸甘油模型组:大鼠尾静脉注射硝酸甘
油(NTG)2μg/kg;PACAP38 低剂量组:大鼠尾静脉给予 3μg/kg 的 PACAP38;PACAP38
中剂量组:大鼠尾静脉给予 6μg/kg 的 PACAP38;PACAP38 高剂量组:给予 12μg/kg 的
PACAP38。
。主要包括以下内容:①耳
红:观察并记录大鼠耳红开始以及结束的时间;②挠头:观察记录大鼠挠头出现及结束的
时间,采用持续时间分段计数的方法记录大鼠在尾静脉注射不同实验试剂后每一时间段中
挠头的次数;③爬笼:采用持续时间分段计数的方法记录大鼠在尾静脉实验干预后每一时
间段内的爬笼次数。
4h 后,腹腔麻醉、灌注固定,于脑立体定位仪上,
由延髓闩部向尾端切取 4mm 脑干标本。应用免疫组织化学技术行 c-fos 蛋白染色,于光学
显微镜下观察 c-fos 蛋白表达情况。
结果:
1. 行为学比较:①耳红:除空白组外,硝酸甘油组和 PACAP38 低、中、高三组均出现
了耳红,且 4 组中出现与消失时间相互平行,组间比较无统计学意义(p﹥)。②挠头,
硝酸甘油组、PACAP38 中剂量组、PACAP38 高剂量组出现了挠头次数增多现象,出现及消
失时间与耳红结果相似。各分段时间挠头次数统计学比较 3 组间无显著差异(p﹥),
空白组与此 3 组分别比较有显著差异(p﹤);PACAP38 低剂量组较空白组未出现明显
的挠头次数增多(p﹥),各分段时间挠头次数与硝酸甘油组比较有统计学意义(p﹤
),③爬笼:硝酸甘油组、PACAP38 中剂量组、PACAP38 高剂量组均较空白组出现了爬
笼次数增多现象(p﹤),三组间比较无统计学意义(p﹥);PACAP38 低剂量组与
空白组比较无明显爬笼次数增多(p﹥),与硝酸甘油组统计学比较有显著性差异(p
﹤)。
I
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2. c-fos蛋白表达:光学显微镜下可见切片背景为淡黄色或无色,阳性细胞呈黄褐色,
多为圆形或卵圆形,以核染为主,易与背景区分,主要分布在三叉神经脊束核尾核(TNC)。
硝酸甘油组、PACAP38 中剂量组、PACAP38 高剂量组大鼠脑干标本 c-fos 免疫阳性细胞较
空白对照组明显增加(p﹤),三组间比较无明显差异(p﹥);PACAP38 低剂量组
脑干标本 c-fos 免疫阳性细胞较空白组无明显增加(p﹥),与硝酸甘油组比较有显著
性差异(p﹤)。
结论:
PACAP38 可以诱导大鼠偏头痛发作,可能成为新的偏头痛大鼠模型的诱导剂制备偏头
痛动物实验模型,并利于更深入的研究偏头痛发病机制及新的防治药物的开发。
关键词:偏头痛;垂体腺苷酸环化酶激活肽;实验模型;三叉神经脊束核尾核
II
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Investigation of the role of Pituitary adenylata cyclase activating
polyepetide in experimental rat of migraine
Abstract
Objective:
Through the observation of the behavioral changes and c-fos expression with trigeminal
nucleus tail nuclear (TN