文档介绍：一、DNA电泳相关:1、DNA电泳缓冲液:(1)Tris-乙酸(TAE)缓冲液:TAE较为常用,且价格低,但其缓冲能力较弱。所以TAE电泳需要蠕动泵使两极贮液槽进行液体循环,而且TAE需要经常更新;且要加入EDTA,目的在于鳌合二价离子,抑制DNase,以保护DNA。①TAE使用液:1×:40mmol/LTris-乙酸1mmol/LEDTA②TAE贮存液(每L):50×:()(2)Tris-硼酸(TBE)缓冲液:①TBE使用液:×:-硼酸1mmol/LEDTA②TBE贮存液(每L):5×:()(3)Tris-磷酸(TPE)缓冲液:①TPE使用液:1×:90mmol/LTris-磷酸2mmol/LEDTA②TPE贮存液(每L):10×:%()2、1%(线性DNA分子大小为400-6000)琼脂糖凝胶DNA电泳操作过程:①制胶:按要求取1g琼脂糖加入1×TAE(×TAE)电泳缓冲液100ml,置于三角瓶中,在沸水浴或微波炉中加热至琼脂糖溶解(一般中低火温,3-5min即可);②溶液冷却至60℃,(2-3ml即可),充分混匀;③迅速倒入备好的胶模中;④凝胶完全凝固后,小心移去梳子和封口胶带,将凝胶放入电泳槽中;⑤加入能没过胶面1mm深的电泳缓冲液(TAE);⑥DNA样品与加样缓冲液(溴酚蓝)混合后,用微量移液吸头加样;⑦盖上电泳槽并通电,使DNA向正极移动(黑极→红极),1-5V/cm(80V电压左右)进行电泳(30min左右);⑧电泳完毕,切断电源,取出凝胶于紫外投射光源下观察并拍照。二、12%SDS-PAGE的相关溶液1、5×加样缓冲液:10%w/vSDS,10mMDTT或β-巯基乙醇,20%v/v甘油,-,%w/v溴酚蓝。(注意:将不含DTT的1×SDS凝胶上样缓冲液置于室温下储存,临用前从1mol/LDTT储液中添加到上述缓冲液中。)5×SampleBuffer:10%w/vSDS10mmol/LDithiothreitol,orbeta-mercapto-ethanol20%v/-%w/vBromophenolblue另:2×SDS上样液缓冲液:-HCl(pH=)20mL,SDS4g,甘油20mL,,DTT3g;2、1×电泳缓冲液:25mMTris-,200mM甘氨酸,%w/vSDS。1×RunningBuffer25mmol/LTris-~250mmol/LGlycine(电泳级)()%w/vSDS可以配成5×贮存液,,然后加入50ml10%(m/v)电泳级SDS的贮存液,用去离子水补至1000ml即可。3、分离胶配方:,-HClpH8