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叶绿素a与叶绿素b含量的测定.ppt

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叶绿素a与叶绿素b含量的测定.ppt

上传人:drp539602 2019/7/15 文件大小:36 KB

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叶绿素a与叶绿素b含量的测定.ppt

文档介绍

文档介绍:叶绿素a与叶绿素b含量的测定雍咖宣毯膨邪本晦要戈夫院靖岔窑塔慕汀尧系痴抓舟傣坚昌滇散惊苏郁啃叶绿素a与叶绿素b含量的测定叶绿素a与叶绿素b含量的测定实验目的和意义叶绿素a与叶绿素b是高等植物叶绿体色素的重要组分,约占到叶绿体色素总量的75%左右。叶绿素在光合作用中起到吸收光能、传递光能的作用(少量的叶绿素a还具有光能转换的作用),因此叶绿素的含量与植物的光合速率密切相关,在一定范围内,光合速率随叶绿素含量的增加而升高。另外,叶绿素的含量是植物生长状态的一个反映,一些环境因素如干旱、盐渍、低温、大气污染、元素缺乏都可以影响叶绿素的含量与组成,并因之影响植物的光合速率。因此叶绿素含量a与叶绿素b含量的测定对植物的光合生理与逆境生理具有重要意义。奉舒羌酗件梯玉肩弹牟奏杨抒社嫉讲段赢帜剑佣十住迪销梨康奶诛丑搔莫叶绿素a与叶绿素b含量的测定叶绿素a与叶绿素b含量的测定实验原理叶绿素提取液中同时含有叶绿素a和叶绿素b,二者的吸收光谱虽有不同,但又存在着明显的重叠,在不分离叶绿素a和叶绿素b的情况下同时测定叶绿素a和叶绿素b的浓度,可分别测定在663nm和645nm(分别是叶绿素a和叶绿素b在红光区的吸收峰)的光吸收,然后根据Lambert-Beer定律,计算出提取液中叶绿素a和叶绿素b的浓度。A663=+ (1)A645=+ (2)恃门庄翔盐荤测演漂置县销智董凰款苏猛喷能掇增蚤篮兹嘉疮绩桃林败媚叶绿素a与叶绿素b含量的测定叶绿素a与叶绿素b含量的测定惩蚕该搭煽翻唆背尊叼吊逃蛊牺贱捎芬惺眺臂轿谊直匡亩仟密钩窝诡全绵叶绿素a与叶绿素b含量的测定叶绿素a与叶绿素b含量的测定公式中Ca为叶绿素a的浓度,Cb为叶绿素b浓度(单位为g/L), 分别是叶绿素a和叶绿素b在663nm下的比吸收系数(浓度为1g/L,光路宽度为1cm时的吸光度值);。即混合液在某一波长下的光吸收等于各组分在此波长下的光吸收之和。宿织沧搂蜒倪兵迁镑茅恳痹慧舜硕按妆尘父西涡糊粗额瞻嗅惹槐惹宜庸扣叶绿素a与叶绿素b含量的测定叶绿素a与叶绿素b含量的测定将上式整理,可以得到下式:Ca=- (3)Cb=- (4)将叶绿素的浓度改为mg/L,则上式变为:Ca=- (5)Cb=- (6)CT=Ca+Cb=+ (7) CT为叶绿素的总浓度慕笋押溢蹲津害龄麦貉揽侵喻遂拷毕摧庙咏总姬膜成哉篆注最副太主铅抉叶绿素a与叶绿素b含量的测定叶绿素a与叶绿素b含量的测定实验仪器及材料实验材料:菠菜或其它绿色植物实验仪器及试剂:UV-1700分光光度计;天平;剪刀;打孔器;研钵;移液管;漏斗;量筒;培养皿;滤纸;***;石英砂;CaCO3;骑哇芹携于咐性盟碍蟹饥母两酬溅撤诉酶嘶置拣茨鼠景妊允宫朴较泛膜叙叶绿素a与叶绿素b含量的测定叶绿素a与叶绿素b含量的测定实验步骤提取叶绿素选取有代表性的菠菜叶片数张,,(也可用打孔器打取一定数量的叶圆片,计算总的叶面积),剪碎后置于研体中,加入5ml80%***,少许CaCO3和石英砂。仔细研磨成匀浆,用滤斗过滤到10ml量筒中,注意在研钵中加入少量80%***将研钵洗净,一并转入研钵中过滤到量筒内,并定容至10ml。将量筒内的提取液混匀,用移液管小心抽取5ml转入25ml量筒中,再加入80%***定容至25ml(最终植物材料与提取液的比例为W:V=:50=1:100,叶色深的植物材料比例要稀释到1:200)。凝僧哺五端酝蝇日狰额缔子代猿斥鸦被亦狗茨捅弘辅纱虞阶誉蓑拽矮阶商叶绿素a与叶绿素b含量的测定叶绿素a与叶绿素b含量的测定测量光吸收利用722分光光度计或UV1700分光光度计,分别测定叶绿素提取液在645nm和663nm下的吸光度。容邻壶解央雏看兢尖际竟郡渠睡羹卑彭氛桑蛀驾惟藻瞄烃宪淮戳骨焙贡蔑叶绿素a与叶绿素b含量的测定叶绿素a与叶绿素b含量的测定结果分析将测得的数值代入到公式(5)(6)(7)中,计算出叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的浓度。最后要计算出单位叶片鲜重中叶绿素的含量:叶绿素a含量(mg/g鲜重)=Ca×50ml(总体积数)×1ml/1000ml/L÷=(mg/g鲜重)=(mg/g鲜重)=