文档介绍：Chapter 13
细胞衰老senescence和凋亡(apoptosis)
第一节细胞的衰老
一、早期的细胞衰老研究
100年前魏斯曼的种质不死学说
原生动物细胞
34年的鸡心细胞的否定
小鼠L系细胞
HeLa肿瘤细胞
Hayflick limitation
1961年,Hayflick 首次报道了体外培养的人成纤维细胞(human fibroblast)具有增殖分裂的极限。他利用来自胚胎和成体的成纤维细胞进行体外培养,发现胚胎的成纤维细胞分裂传代50次后开始衰退和死亡,而来自成年组织的成纤维细胞只能培养15~30代就开始死亡。
。
二、Hayflick界限
体外培养人的成纤维细胞,在体外分裂次数有限,证明细胞不是不死的
将老年的人的成纤维细胞与年轻的人的成纤维细胞同时培养,年轻状态的细胞在体外分裂次数更多,说明衰老与供体细胞的年纪有关
老年的人的成纤维细胞与年轻的人的成纤维细胞进行混合和单独培养比较实验,发现二者的分裂次数没有变化,说明与培养的环境无关
利用细胞杂交的方法确定引起衰老的真正原因。年轻的胞质体与年老的完整细胞融合,杂种细胞不能分裂;年老的胞质体与年轻的完整细胞融合,杂种细胞分裂能力与年轻相同,证明细胞核是导致衰老的真正原因
Hayflick的一些经典实验
体外培养成纤维细胞
来自胎儿可传代 50 次(与供体年龄
来自***可传代 20 次有关)
来自小鼠可传代 14-28 次(与供体物种
来自乌龟可传代 90-125 次特性有关)
体外培养的人和动物细胞的寿命与他们个体寿命的关系
物种成纤维细胞传代数个体最长寿命(年)
龟 90-125 175(?)
水貂 30-34 10
鸡 15-35 30
小鼠 14-28
人
胚胎 40-60 110
出生至15岁 20-40
15岁以上 10-30
早老病患者 2-10 10-20
Human fibroblast cultured in vitro
YONG
OLD
早衰症是人体衰老中的一种病症
3 早老症病人细胞培养只传代2-4次
4 用巴氏小体做标记
老男和少女细胞的培养
证明细胞内部决定衰老
5 胞质体和完整细胞的融合实验
证明是细胞核决定衰老
Hayflick得出这样的结论
细胞、至少是培养的细胞,不是不死的而是有一定寿命的。它们的增殖能力不是无限的,而是有一定界限的。这就是有名的Hayflick界限。