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结核分枝杆菌的核酸检测-PPT讲义.ppt

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结核分枝杆菌的核酸检测-PPT讲义.ppt

上传人:书犹药也 2019/7/16 文件大小:3.29 MB

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结核分枝杆菌的核酸检测-PPT讲义.ppt

文档介绍

文档介绍:结核分枝杆菌的核酸检测结核分枝杆菌核酸检测是检测结核分枝杆菌特异的核酸序列;阳性结果提示该检测结核分枝杆菌核酸的存在,在排除核酸污染的情况下,可确定该检测标本中存在结核分枝杆菌。结核分枝杆菌核酸检测较常采用的目的片段有16SrRNA、IS6110、MBP64、rpoB、hsp65等结核分枝杆菌核酸检测增加分子生物学阳性可以作为确诊标准,及强调病原学检查的重要性。。4诊断原则肺结核的诊断是以病原学(包括细菌学、分子生物学)检查为主,结合流行病史、临床表现、胸部影像、相关的辅助检查及鉴别诊断等,进行综合分析做出诊断。以病原学、病理学结果作为确诊依据。,及胸部影像学检查支持即可确诊。常用技术传统实时荧光定量PCR检测半巢式全自动实时荧光定量PCR检测环介导等温扩增检测实时荧光核酸恒温扩增检测交叉引物恒温扩增检测基因探针检测抗酸染色每张检查3-5min或更长时间→%(2-6周)再加入不同浓度抗菌药物的培养基中继续培养4-8周报告药敏结果2014年WHO关于结核诊断的标准肺结核所有患者,包括儿童,当疑似肺结核并可咳痰时,应送2份痰做涂片镜检或1份痰做XpertMTB/RIF检测对于涂阴疑似肺结核患者,应当使用XpertMTB/RIF或培养进行诊断耐药结核当患者具有耐药结核的风险,或者合并HIV感染,或者病情严重时,应使用XpertMTB/RIF做初始诊断;肺外结核所有患者,包括儿童,怀疑有肺外结核时,应当采集相应的样本进行微生物学和组织学检查;优先推荐使用XpertMTB/RIF做初始诊断GeneXpertXpertMTB/RIF一种半巢式实时荧光PCR体外诊断技术,可以检测结核分枝杆菌以及利福平耐药性;针对rpoB基因81bp利福平耐药核心区间(RRDR)设计引物、探针。5个探针结合到野生型,而不是突变体目标。每个探针用不同的荧光染料标记,允许同时检测。痰标本与处理液1:2混合吸取2ml处理样品到反应盒将反应盒放入检测模块(手工操作完成)标本自动清洗过滤超声裂解DNA提纯DNA和PCR反应试剂混合半巢式实时荧光定量核酸扩增检测打印检测报告获得检测结果时间:1小时50分钟系统内自动完成INH单耐药的患者通常不会考虑立即改变治疗方案,与此相反,对RIF单耐药的患者,无论INH是否耐药,都会采取与耐多药患者相同的治疗方案1。 约90%利福平耐药的结核患者同时异烟肼耐药,也就是耐多药结核患者2。,.SuitabilityofXpertMTB/(49):2827-.2015(31):41--TB的防控“结核+利福平耐药”对多耐结核控制产生的效果最为显著。即便补充异烟肼耐药,能提升的效果有限。