文档介绍：实验七动物组织核酸提取与鉴定anyLogo一、实验原理核酸是生物体最重要的组成成分之一。动物组织细胞中的核糖核酸(RNA)与脱氧核糖核酸(DNA)大部分与蛋白质结合,以核蛋白的形式存在。因此分离核酸时必须使核酸与蛋白质分离,并除去蛋白质。本实验是将组织匀浆后加水饱和酚溶液,振荡使蛋白质变性,变性蛋白质溶于酚相或两界面处形成凝胶层。而DNA或RNA则溶于上层的水盐溶液中。在离心后上层的水盐溶液中加入乙醇,核酸不溶于乙醇而形成白色絮状沉淀析出。DNA与RNA均由单核苷酸组成,每个单核苷酸中含有磷酸、嘌呤与嘧啶、戊糖(核糖、脱氧核糖)。核酸用硫酸水解后,即可游离出这三种物质。用下述方法可分别鉴定出这三类物质。anyLogo(1)磷酸:用钼酸铵与之作用可生成磷钼酸,磷钼酸可被氨基萘酚磺酸还原成蓝色钼蓝(2)嘌呤碱:用硝酸银与之反应生成灰褐色的絮状嘌呤银化合物。(3)戊糖::用硫酸使之生成糠醛,糠醛与3,5-:在硫酸作用下,与二苯胺生成蓝色化合物anyLogo二、试剂及器材钼酸铵试剂氨基萘酚磺酸3,5-%NaCl20%三氯醋酸水饱和酚预冷的95%乙醇浓硫酸5%硝酸银5%硫酸anyLogo实验步骤一::全班制备一份。取冻存兔肝20g置匀浆器中,%NaCl溶液60ml制成匀浆。:将匀浆取出分装在四个100ml塑料离心管内,分别加入1mol/LNaCl溶液15ml,混匀,再加入水饱和酚溶液40ml,剧烈振荡10min,然后4000rpm离心20min。将上清轻轻吸入一烧杯中,每2人一组取上清液4ml于小离心管中,加入等量的预冷的95%乙醇,即可见白色沉淀逐渐析出,静置10min后,3500rpm离心10min,倾去上清,即得白色的核酸钠沉淀。anyLogo实验步骤二、核酸的水解在含有核酸钠盐的离心管内加入5%硫酸4ml,用玻璃棒混匀,转入小试管中,在沸水浴中加热15min。anyLogo实验步骤三、DNA与RNA成分鉴定(1)嘌呤碱的鉴定:试管号水解液5%硫酸浓氨水5