文档介绍：华中科技大学
硕士学位论文
白藜芦醇对高脂高糖饮食大鼠肾损伤的保护作用
姓名:张嫦慧
申请学位级别:硕士
专业:营养与食品卫生学
指导教师:应晨江
2011-01
华中科技大学硕士学位论文
白藜芦醇对高脂高糖饮食大鼠肾损伤的保护作用
硕士研究生:张嫦慧
导师:应晨江教授
孙秀发教授
摘要
目的:大量研究表明长期高脂高糖饮食会引起体内脂质和血糖代谢紊乱,
严重时引起高脂血症和糖尿病。体内活性氧的增加在以上疾病的发生发展中起
重要作用,体内抗氧化酶系统如超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶等由于
长期氧化应激的作用水平下降。研究表明氧化应激在糖尿病肾病的发生中起重
要作用,而糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症之一。高脂高糖饮食引起的早期
代谢综合症的表现虽类似于糖尿病的早期改变,但对肾脏的氧化损伤及机制尚
有待于进一步研究。
肾素-血管紧张素-醛固酮系统是与肾脏病变直接相关的内分泌系统,其中
血管紧张素和醛固酮作用的增加是引起肾脏病变的主要因素。大量研究证实,
糖尿病患者肾脏局部血管紧张素 II 活性增高,血管紧张素 II 是肾素-血管紧张
素-醛固酮系统的中心,血管紧张素 II 可以诱导细胞氧化应激,还可促进致纤维
化因子如纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)及与 PAI-1 相关的信号转导通路分子
(如 PI3K/Akt 通路的信号分子)引起肾小球硬化,目前已经发现 PI3K/Akt 通
路在多种细胞因子的致纤维化过程中发挥作用。有研究表明多酚类化合物具有
肾脏保护作用并可以抑制 PAI-1 和 PI3K 的表达。白藜芦醇,一类主要存在于葡
萄、藜芦等植物中的多酚类化合物,作为一种天然的抗氧化剂可能改善高热量
高脂饮食引起氧化应激。为此,本实验将探讨白藜芦醇对高脂高糖饮食大鼠肾
脏的保护作用及其对肾脏中 PI3K、PAI-1 表达的影响,并进一步了解白藜芦醇
可能的抗氧化、抗纤维化作用机制。
研究方法:60 只雄性 Wistar 大鼠分为五组:正常对照组(Con)、高脂高糖
组(H)、高脂高糖+白藜芦醇剂量组(低、中、高剂量白藜芦醇处理组,R1、
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R2、R3)。Con 组大鼠喂基础饲料,H 组及高脂高糖+白藜芦醇剂量组喂高脂
高糖饲料,并通过灌胃给予溶解在植物油里的白藜芦醇(50mg/,
100mg/, 150mg/),高脂组灌胃等量植物油,定期称量动物体重。13w
后处死所有大鼠,分离血清于-80℃冰箱保存。测定血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、
甘油三酯(TG),肾组织匀浆液总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(T-SOD)、
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。荧光实时定量聚合酶
链式反应法检测肾脏 PI3K、PAI-1mRNA 表达水平,免疫印记法测定 PI3K、PAI-1
蛋白表达水平。
结果:(1)高脂高糖饮食 8w 时,与 Con 组相比,H 组大鼠体重明显升高,
R2、R3 组大鼠与 H 组相比体重降低,13w 时各组大鼠体重比较情况与 8w 类似。
(2) 与 Con 组比较,H 组大鼠 FPG 水平显著升高,R2 组 FPG 水平比 H 组显著
降低。与 Con 组比较,H 组大鼠血浆 TC、TG 水平显著升高,R2 组、R3 组大
鼠血浆 TC 及 R2 组 TG 水平比 H 组显著降低。(3)H 组大鼠肾脏 MDA 含量比
Con 组明显升高,与 H 组相比 R1 组大鼠肾脏 MDA 含量降低。而与 Con 组相
比,H 组大鼠肾脏 T-AOC、T-SOD 水平显著降低,白藜芦醇提高 T-AOC、T-SOD
和 GSH-Px 水平。(4)与 Con 组相比 H 组大鼠肾 PAI-1mRNA 及 PI3K、PAI-1 蛋
白表达水平升高,白藜芦醇组与 H 组大鼠相比,其肾脏 PI3K、PAI-1mRNA 及
蛋白表达水平降低。
结论:高脂高糖饮食诱导大鼠肾脏处于明显的氧化应激状态,这可能是肾
损害发生的原因之一。而白藜芦醇对高脂高糖饮食引起的氧化性肾损伤有保护
作用。
创新点:我们首先研究了高脂高糖饮食模型大鼠和正常组大鼠肾组织中
PI3K、PAI-1 的表达差异,并提出了白藜芦醇通过调节大鼠肾脏 PI3K、PAI-1
表达来发挥的抗纤维化作用及其调控机制。鉴于氧化应激在肾损伤发展中的重
要作用以及白藜芦醇的抗氧化、抗纤维化意义,为揭示肾损伤的发病机制,为
探讨白藜芦醇预防改善肾损伤机理研究开辟了一个新思路,具有积极的理论和
现实意义,相