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溶液配制.doc

上传人:ayst8776 2019/7/28 文件大小:37 KB

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文档介绍

文档介绍:碱裂法提取质粒1、LB培养基(配制1)胰化蛋白胨1%%NaCl1%()方法:分别称取胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl10g,溶于950ml去离子水中,加热直至溶质全部溶解。用5mol·L-1NaOH()。用去离子水定容至1L。。(若制备固体培养基定容前加入2%的琼脂,加热使其溶解,。再用去离子水定容至1L。。)2、碱裂解溶液Ⅰ(配制100ml)葡萄糖50mmol/LTris-Cl()25mmol/LEDTA()10mmol/L方法:、、,加入80ml的蒸馏水使之溶解,。,装于棕色试剂瓶中保存于4℃。3、碱裂解溶液Ⅱ(配制100ml)%(m/V)SDS方法:、1gSDS置于100ml的烧杯中,加入80ml蒸馏水使之溶解,转入容量瓶中定容至100ml。装于棕色试剂瓶中,室温保存。注:碱裂解溶液Ⅱ要现用现配制,室温下使用。4、碱裂解溶液Ⅲ(配制100ml)5mol/:用量筒分别量取5mol/[5mol/L乙酸钾的配制(100ml):,加入80ml蒸馏水使之溶解,转入容量瓶中定容至100ml。]、,加蒸馏水定容至100ml。装于棕色试剂瓶中保存于4℃。用时置于冰浴中。5、STE溶液(配制10ml)-Cl()1mmol/LEDTA()方法:、、,。装于棕色试剂瓶中,室温保存。6、TE()缓冲液(配制10ml)100mmol/LTris-Cl()10mmol/LEDTA()方法:、,。,装于白色试剂瓶中室温保存。7、1mg/ml胰RNase(配制2ml)用2mlTE()溶解2mg粗制胰RNaseⅠ,置于EP管中保存于4℃。注:TE()缓冲液(配制10ml)100mmol/LTris-Cl()10mmol/LEDTA()方法:、,再分别加入2ml的蒸馏水使之溶解,,将两者混匀后转入同一容量瓶中定容至10ml。,装于白色试剂瓶中室温保存。感受态细胞的制备与转化1、