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烟草蚀纹病毒蛋白酶说明书.doc

上传人:jianjian401 2019/7/31 文件大小:46 KB

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烟草蚀纹病毒蛋白酶说明书.doc

文档介绍

文档介绍:TEVProtease产品概述TEVProtease(烟草蚀纹病毒蛋白酶;oetchvirusprotease)是来源于烟草蚀纹病毒(TEV)Nla的重组蛋白酶,此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。TEV蛋白酶具有很强的位点特异性,能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly),最普通的是ENLYFQG,其切割位点在谷氨酰***和甘氨酸或丝氨酸之间。--30℃的广泛范围内皆有活性,使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而修改。该酶带有His-sumoTag经6×His标签纯化,剪切反应完毕后可通过Ni-NTA(产品货号:PAN001)去除。本蛋白酶来源于大肠杆菌重组表达。酶活性单位定义在1XTEVBuffer(50mMTris-HCl,,,1mMDTT)中,30℃条件下反应1小时,能够切割3µg的反应底物达85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。产品溶液组分TEVprotease储存液10XCleavageBuffer25mMTris-HCl,-HCl,%(V/V)Glycerin推荐反应体系反应物组成体积融合蛋白50µgTEVProtease2µl(10U/µl)10XTEVBuffer10µlddH2O至100µl不同温度下的参考反应时间:4℃反应16小时20℃反应6小时30℃反应2小时活性测试待测融合蛋白100µg,加入TEVprotease2µl,4℃反应16小时,取酶切前后样品SDS-PAGE检测,如右图所示>90%融合蛋白被切割。储存条件长期储存于-80℃,可保存2年;或小量分装后保存于-20℃,可保存6个月,避免反复冻融。10XTEVBuffer置于-20℃保存。包装规格货号规格RPP002-100100URPP002-500500URPP002-20002000U

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