文档介绍：5-Aza-CdR对人食管癌细胞株生物学行为及TFPI-2mRNA表达的影响弗镰楚琳猖版谚博址俺段售工克楞霉禹戈怕润垣矛东必苏毗字辨宽预三德医学高级职称论文医学高级职称论文5-Aza-CdR对人食管癌细胞株生物学行为及TFPI-2mRNA表达的影响作者:杜雅冰,邵应举,樊青霞,孙桢,王琳,赵培荣作者单位:(郑州大学第一附属医院肿瘤内科,河南郑州 450002)【摘要】目的探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2-deoxycytidine,5-Aza-CdR)干预对食管鳞癌细胞株Eca9706生长增殖及其组织因子途径抑制物2(tissuefactorpathwayinhibitor-2,TFPI-2)基因表达的影响。方法选取食管鳞癌细胞株Eca9706,并用不同浓度的5-Aza-CdR处理该细胞株。MTT法检测干预前后细胞增长率的变化,FCM法检测干预前后细胞凋亡率的变化,RT-PCR技术检测干预前后Eca9706细胞TFPI-2基因mRNA的表达,免疫组化检测干预前后Eca9706细胞TFPI-2蛋白的表达。结果食管鳞癌细胞株Eca9706存在TFPI-2基因超甲基化状态,经5-Aza-CdR处理后,超甲基化状态解除,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡率明显提高(P<);细胞中TFPI-2蛋白表达明显增强,同时mRNA的表达水平也较处理前明显提高(P<)。结论食管癌细胞系TFPI-2基因超甲基化可抑制其mRNA表达,当其超甲基化解除后,细胞增殖受到抑制,同时细胞凋亡率相应提高。溺眩偶咆拳亥仔卢办务段患衔垮伦基赚惹骸鼻苞筐烬婉疥膘购袱抡恭宇丹医学高级职称论文医学高级职称论文【关键词】食管癌;组织因子途径抑制物-2;5-氮杂-2-脱氧胞苷;甲基化;免疫组化;逆转录聚合酶链反应;凋亡ABSTRACT:Objective Toexploretheeffectsof5-Aza-2-deoxycytidine(5-Aza-CdR)interventiononthegrowthandproliferationofEca9706celllineandproteinexpressionoftissuefactorpathwayinhibitor-2(TFPI-2).Methods Eca9706celllinewastreatedby5-azaCdRofdifferentconcentrations;MTT,flowcytometry,immunohistochemistryandRT-hecellgrowth,apoptosis,andtheexpressionofTFPI- Eca9706celllinehadhypermethylationofTFPI--Aza-CdRtreatment,theproliferationofEca9706wasinhibited,theapoptosisratewasalsoincreasedsignificantlyintheconcentration--PCRdetectedthatmRNAexpressionofTFPI-2geneinEca9706celllinerecoveredsignificantly(P<).Conclusion 5-Aza-CdRcanslowthegrowthofEca9706cell,increasetheapoptosisrate,reactivatetheTFPI-:esophagealcarcinoma;tissuefactorpathwayinhibitor-2;5-Aza-CdR;methylation;immunohistochemistry;RT-PCR;apoptosis依豺咋隐瘟汛词猪陀苦盼蹄罩浙锡牟欣座泽约栅斌俐闸巧铰撂妹让彰串归医学高级职称论文医学高级职称论文组织因子途径移植物2(tissuefactorpathwayinhibitor,TFPI-2)是丝氨酸蛋白酶抑制物,在调控肿瘤细胞浸润转移方面起着重要作用。目前,关于TFPI-2在食管癌中的基因表达情况的分析研究尚少。本研究旨在探讨TFPI-2基因的失活机制,并寻找食管癌治疗的新靶点。1 材料RPMI-1640培养基购自北京索莱宝生物科技有限公司;标准胎牛血清购自天津市灏洋生物制品科技有限公司;Trizol试剂购自MBI公司;RT-PCR试剂盒购自MBI公司;5-Aza-CdR购自Sigma公司;人食管癌细胞株E