文档介绍：1型糖尿病大鼠模型的建立及糖尿病并发症相关指标的测定
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:徐华何毅张鸣号李桂忠曹军
【摘要】目的为了研究链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导大鼠1型糖尿病模型的方法并观察糖尿病并发症指标的变化。方法采用一次性腹腔注射STZ(60mg·kg-1),监测不同时点大鼠的空腹血糖、体重、饮水量及血浆中的丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和一氧化氮(nitric oxide,NO)等指标。结果大鼠注射STZ 60mg·kg-1 72 h后血糖值达到成模标准,并逐渐出现糖尿病表现,观察7周,始终满足成模标准,未见转复。糖尿病组大鼠肾脏及肝脏肥大指数较对照组增加()。糖尿病组大鼠较对照组相比血浆中脂质过氧化产物MDA 水平升高,而SOD 和NO 水平下降()。结论本实验1型糖尿病模型大鼠造模成功且模型稳定,并出现了并发症发生的部分指标变化。
【关键词】 1型糖尿病;大鼠模型;血糖
近年来,随着人们生活水平的提高,糖尿病的发病率呈逐年上升的趋势,心血管、肾脏、视网膜等并发症日趋严重。1型糖尿病及其并发症的病因、发病机理尚未完全阐明,预防和治疗仍不完善,因此建立较理想的动物模型对研究该病的发病机制和治疗具有重要意义。目前,国内外普遍使用链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病动物模型,但成模时间从48 h 至2个月不等[1-4],模型的稳定性也无权威报道。本实验主要针对这一模型的制备方法进行探讨,并测定与糖尿病并发症的发生相关的部分指标。
1 材料与方法
实验动物选择和喂养雄性Sprague-Dawley 大鼠,体重120~160g,清洁级,由宁夏医科大学实验动物中心提供。饲养室内通风良好,室温18~25℃,相对湿度40%~70%,每日12 h光照维持,昼夜循环,饲养时间为9~11月份。自由摄食、饮水。
主要试剂和设备 STZ(Sigma公司);微量血糖测定仪,美国强生稳豪(配套血糖试纸);MDA、SOD及NO测试盒均购自南京建成生物技术有限公司;其余试剂均为市售分析纯。RC5C高速低温冷冻离心机(美国,Sorvall);Sartorius电子分析天平(德国);pH 计(型号PB220,德国塞多利斯)。
STZ 液配制将STZ mol·L-1、pH (pH 计检测)、无菌的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液中,制成浓度为12 mg·mL-1(%)的STZ液。其中,柠檬酸- mol·L-1 mol·L-1 ∶ 混合摇匀而成。
实验分组和模型建立雄性SD大鼠,所有大鼠适应性喂养1周,药物注射前观察大鼠健康状况,1周内饮食正常、体重不减轻、血糖正常者即可用于实验。取上述大鼠20只(体重120~160g)随机分为两组(每组10只):糖尿病模型组和正常对照组。实验前动物禁食12h,模型组一次性快速腹腔注射STZ 液(60mg·kg-1);对照组腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液。72h 后血糖值≥ m