文档介绍：Id1在肝细胞癌中的表达及其临床意义
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:刘豫瑞, 方明霞, 曾达武
【摘要】目的研究DNA结合/分化抑制蛋白1(Id1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法 HCC手术切除标本40例,癌旁肝组织23例(离癌灶3 cm),并以15例正常肝组织为对照,用链酶抗生物素蛋白过氧化物酶免疫组织化学(SP)方法检测Id1、血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)和Bcl2的表达,并分析Id1与其他各指标的关系。结果 Id1、VEGF、IGF1R和Bcl中的阳性表达率(分别为85%、%、85%、40%)及表达强度均明显高于对照组。Id的分化程度呈正相关,即癌细胞分化越高Id1表达越强;Id1在转移的或5 中的表达低于无转移的或5 ;的分化程度呈正相关,而IGF的分化程度呈负相关;Bcl的分化程度无关;Id1的表达与Bcl2无相关性,而与VEGF呈正相关(r=,),与IGF1R呈负相关(r=-,P=)。结论 Id
中参与了肿瘤血管形成和细胞增殖调控,但可能不直接参与抑制细胞凋亡的调控。
【关键词】抑制因子,免疫; 癌,肝细胞; 肝肿瘤; 血管内皮生长因子类; 原癌基因蛋白质cbcl2; 受体,IGF1型; 免疫组织化学
肝细胞癌(HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一,其预后较差,死亡率仅次于胃癌和食管癌,的人数中,我国约占40%。寻找早期诊断、研究的重要内容。DNA结合/分化抑制蛋白1(inhibitor of differentiation/DNA binding1,Id1)是1990年代发现的一种分化抑制因子,其通过抑制环螺旋环转录因子对细胞增殖与肿瘤发生起到关键的作用。有研究表明Id1可促进细胞增殖,参与肿瘤的血管形成,促进肿瘤的生长及转移[13]。笔者通过检测Id中的表达情况,分析其与血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)及Bcl2表达的相关性,初步探讨Id中的作用。
1 资料与方法
一般资料 40例癌组织标本为本院2004年1月-2005年12月的手术标本,其中男性29例,女性11例,年龄中位数52岁(31~75岁)。术前均未行化疗、放疗和其他治疗,,其中5 cm的17例,≤5 cm的23例。组织按癌细胞分化程度分级,转移情况以有无淋巴结转移及门静脉癌栓为准。标本经10%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,4
μm连续切片。取癌旁肝组织23例(离癌灶3 cm)以及因外伤切除或肝脓肿手术切除的正常肝组织15例为对照。
免疫组织化学采用链酶抗生物素蛋白过氧化物酶免疫组织化学(SP)法,操作按说明书进行。以磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)置换一抗作为阴性对照。所用一抗包括Id1兔抗人多克隆抗体1∶100(Santa Cruz C20, USA)、小鼠抗人VEGF单克隆抗体(克隆号JH121)、小鼠抗人IGF1R单克隆抗体(2431)和小鼠抗人Bcl2单克隆抗体(克隆号100/D5),均购自美国Neomarkers公司。
结果判断根据阳性细胞染色程度(A)判断,阳性反应为胞膜或胞质内出现棕黄色颗粒状染色,无染色为0分、较多淡黄色颗粒为1分、较多棕黄色颗粒为2分、大量深棕黄色颗粒为3分;每片观察5个高倍镜视野(×400),计数癌细胞总数和阳性细胞个数,得出阳性细胞百分率(B),阳性细胞数<30%为1分、31%~75%为2分、>76%为3分。A×B得0者为(-),1~4分为(+),4分为();“+”为低表达,“”为高表达。
统计学处理数据采用SPSS ,。
2 结果
Id1、VEGF、IGF1R及Bcl和癌旁组织中的表达 Id1阳性染色主要位于胞质,部分表达于胞膜;VEGF及Bcl
2阳性染色主要位于胞质;IGF1R阳性染色主要位于胞膜。Id1、VEGF、IGF1R及Bcl和癌旁组织中的表达情况见表1。
Id1、VEGF、IGF1R及Bcl中的表达与其组织分化程度相关性 HCC中Id分化程度呈正相关(r=,),大小、有否转移具有相关性;的分化程度呈正相关(r=,);IGF的分化程度呈负相关(r=-,);Bcl分化程度无关(r=-,),具体见表1,2。
HCC中I