文档介绍：一、单增李斯特菌的概述生活中李斯特菌到处存在,但其中只有一种为致病菌。李斯特菌可从各种食品样本中分离出来包括乳制品、肉类、蔬菜和海鲜,也可从食品加工过程中的环境中分离而来。李斯特菌中毒严重的可引起血液和脑组织感染,很多国家都已经采取措施来控制食品中的李斯特菌,并制定了相应的标准。目前国际上公认的李斯特菌共有七个菌株:(1)单核细胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes/)(2)绵羊李斯特菌(Listeriaiuanuii)(3)英诺克李斯特菌(Listeriainnocua)(4)威尔斯李斯特菌(Listeriawelshimeri)(5)西尔李斯特菌(Listeriaseeligeri)(6)格氏李斯特菌(Listeriagrayi)(7)默氏李斯特菌(Listeriamurrayi)其中单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes/)是唯一能引起人类疾病的。单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。它广泛存在于自然界中,食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险,该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。在美国LM被列为7种主要的食源性致死病菌之一,已经被WHO食品安全工作计划列为重点检测的食源性病原菌之一。LM为需氧或兼性厌氧菌,生长温度为1~45℃,对不利环境具有较强的耐受能力,在4℃冰箱中也可生长繁殖,~,1年后仍可检出,这使其危害性进一步增大。另外,LM病原体定居在细胞内,因此应用抗生素治疗效果不理想。由于LM引起的疾病及其食源性感染日益引起世界各国的重视,对该病建立快速、灵敏、准确的检测是有效防治本病、诊断病原菌和保证食品卫生安全的重要手段。二、单增李斯特菌的检测方法(1)平板培养法(国标):用不同浓度的沙门菌菌悬液人工染菌二类食品各4o份,用增菌液两步增菌,两种分离培养基分离,对比检出率及分离效果。%,。(2)显色培养基:上海欢奥科贸有限公司(3)PCR试剂盒:生物梅里埃的检测系统、杜邦:BAX®系统检测法,BAX®系统的单增李斯特菌检测法的灵敏度和特异性比率达到了98%,,并通过USDA-FSIS和AOAC国际的认证,成为官方检测法。美国伯乐iQ-Check单增李斯特菌的检测:iQ-Check系统采用了所有的实时荧光PCR方法的优点为食品中病原微生物提供快速和可靠地检测解决方案。iQ-Check试剂盒为食品和环境样品中的单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes)定性检测试剂盒。陆桥:单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)荧光定量PCR检测试剂盒168048T索奥:单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)(4)胶体金快速检测卡:无锡中德伯尔生物技术有限公司(5)单增李斯特菌ELISA检测试剂盒:德国拜发(苏微有代理)三、单增李斯特菌抗体的制备(1)单增李斯特菌(Listeriamonocytogens)鸡卵黄抗体的制备菌体抗原的制备动物免疫特异性IgY的提取,最好的用硫酸铵盐析法(2)单核增生李斯特菌InternalinA