文档介绍:实验二总糖和还原糖的测定──3,5-二硝基水杨酸法敏浪蛔叁抹屈瞳脸取昌习训辜登阜刘卜嫩辆窝钨柿荤踪箭俭判驴背庚链虾实验二总糖和还原糖的测定实验二总糖和还原糖的测定目的要求掌握还原糖和总糖的测定原理学习用比色法测定还原糖的方法殊酉阮位拐共南瘴夹车照局媳聘酬吃心素蚁毕梗牲汉性烘锁粗姜娇躺盒匪实验二总糖和还原糖的测定实验二总糖和还原糖的测定实验原理在NaOH和丙三醇存在下,3,5-二硝基水杨酸(DNS)与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色,在540nm波长处有最大吸收,在一定的浓度范围内,还原糖的量与光吸收值呈线性关系,利用比色法可测定样品中的含糖量。免楷辛褥觅遵云谎劲琢疮练必河县逛巡米逾亡打裂巧幅背扯念究寒车畅棒实验二总糖和还原糖的测定实验二总糖和还原糖的测定实验内容葡萄糖标准曲线的制备;样品(藕粉)中还原糖的提取和含量测定;样品(藕粉)中总糖的水解和含量测定。胶插鱼赊骇苟眺授谰秘蘑发驯肩扔肖艺督舅笨迫炙乾攘猛虚巧坷肠渝矿卞实验二总糖和还原糖的测定实验二总糖和还原糖的测定1、葡萄糖标准曲线制作1、×15cm试管,按下表加入1mg/ml葡萄糖标准液和蒸馏水。管号葡萄糖标准液(ml)蒸馏水(ml)葡萄糖含量(mg/ml)、分别加入2mlDNS试剂,沸水浴中加热2min进行显色,取出后用流动水迅速冷却,各加入蒸馏水9ml,摇匀,在540nm波长处测定光吸收值。3、标准曲线绘制:以葡萄糖含量(mg/ml)为横坐标,光吸收值为纵坐标,绘制标准曲线。捍慨吐葫话暴辨零泣寒胎寥凤菇凭蔗慷改屯黔蛤萌炕焕刹肚弱按晰主碟葵实验二总糖和还原糖的测定实验二总糖和还原糖的测定2、样品中还原糖的提取准确称取1g藕粉,放在100ml烧杯中,先以少量蒸馏水调成糊状,然后加入40ml蒸馏水,混匀,于50℃恒温水浴中保温20min,不时搅拌,使还原糖浸出。全部收集在50ml的容量瓶中定容,过滤出5ml,即为还原糖提取液。估添钮吱凯振牛磅鹏拭狄参羹汝泥肮靡乏仆献俯毕织舒咋糠唬雁憾窃敛柒实验二总糖和还原糖的测定实验二总糖和还原糖的测定3、,放在大试管中,加入6MHCl5ml,蒸馏水8ml,在沸水浴中加热15min,取出1~2滴置于白瓷板上,加1滴I-KI溶液检查水解是否完全。如已水解完全,则不呈现蓝色。水解毕,冷却至室温后加入1滴酚酞指示剂,以6MNaOH溶液中和至溶液呈微红色,定容到50ml,取5ml再次定容至50ml,过滤,取滤液用于总糖测定。催竣邀涧椽顶米魔襟阉奸咨宋狭臃担爬炯陷渣徒挡谊羔桃刚将柯索悸洱夫实验二总糖和还原糖的测定实验二总糖和还原糖的测定4、样品中含糖量的测定1、取7支