文档介绍：左金丸方药3种方法提取液的初步药效学比较
【摘要】目的观察左金丸方药的3种提取液的抑菌、抗炎作用。方法分别制备左金丸的水提取液(WE液)、60%乙醇提取液(AE液)和半仿生提取液(SBE液),采用抑菌环实验和二甲苯致小鼠耳肿胀法分别评价左金丸的AE液、SBE液、WE液的抑菌、抗炎的药效作用。结果左金丸提取液对金黄色葡萄球菌的抑制作用强于大肠杆菌,抑菌环的大小顺序为:SBE液> WE液> AE液。左金丸提取液对二甲苯致小鼠耳肿胀有显著抑制作用,肿胀抑制率大小顺序为:SBE液> WE液> AE液。结论左金丸方药的3种提取液的抑菌、抗炎作用大小顺序为:SBE液> WE液> AE液。
【关键词】左金丸; 药效学; 抗菌; 抗炎; 水提取液; 乙醇提取液; 半仿生提取液
左金丸是由黄连与吴茱萸按6∶1比例制成的水丸,具泻火、疏肝、和胃、止痛功能,为辛开苦降的代表方剂,现代临床上常用于治疗胃炎、胃脘痛、消化性溃疡等疾病。现代药理研究表明,左金丸具有抗溃疡、抑菌、抗炎等作用。
目前对左金丸方药的水提取液、60%乙醇提取液和半仿生提取液的抑菌、抗炎的药效作用的研究未见报道。本研究以左金丸方药的水提取液(WE液)、60%乙醇提取液(AE液)和半仿生提取液(SBE液),采用抑菌环实验和二甲苯致小鼠耳肿胀法分别评价左金丸的AE液、SBE液、WE液的抑菌、抗炎的药效作用。
1 抗(抑)菌实验(抑菌环实验)
利用抑菌剂不断溶解琼脂,扩散形成不同浓度梯度,以显示其抑菌作用。实验通过抑菌环大小以判断其是否具有抑菌能力。本实验适用于抑菌剂与溶出性抗(抑)菌产品的鉴定。
器材金黄色葡萄球菌( 6538)、大肠杆菌(8099) 菌悬液,抑菌剂载体(5 mm 直径圆形新华一号定性滤纸片,经压力蒸气灭菌处理后,置120℃烤干2 h,保存备用),微量移液器(5~50 μl,可调式),游标卡尺,营养琼脂培养基。
供试液的制备提取前将黄连、吴茱萸药材分别粉碎,过14目筛。
水提取液按照处方比例分别称取黄连粗粉12 g, 吴茱萸粗粉2 g,用水加热回流提取 3 次,时间分别为2,2,1 h,加水量依次为药材量的10,8,8倍,4层纱布加100目筛滤过,合并提取液,减压浓缩至60 ml样品液( g)。
60%乙醇提取液按照处方比例分别称取黄连粗粉12 g,吴茱萸粗粉2g,用60%乙醇浓度加热回流提取工艺提取,回流3次,时间分别为2,2,1 h,加醇量依次为药材量的10,8,8倍,4层纱布加100目筛滤过,合并提取液,回收乙醇,减压浓缩至60 ml样品液( g)。
半仿生提取液按照处方比例分别称取黄连粗粉12 g,吴茱萸粗粉2 g, 混匀,加热回流提取3次(加水量依次为药材量的10,8,8倍,用水煎煮3次,第 1 mol/L ;第2、 mol/L NaOH 调至pH ,;煎煮时间依次为170 min,85 min,40 min),提取液用 4 层纱布加100目筛分别滤过,离心(2 000 r/min,20 min),合并上清液,减压浓缩至60 ml样品液