文档介绍：高效液相色谱法测定人参渣中人参多糖的含量
【关键词】人参多糖高效液相色谱法
人参,别名为山参、园参,为五加科植物人参Panax ginseng ,其叶也入药,称为参叶。我国是世界上人参生产大国,其产量占全世界的60%,种植地主要分布于我国东北各省,辽宁、吉林有大量栽培,近年河北、山西、陕西、甘肃、宁夏、湖北等省区也有种植[1]。作为我国特产的珍贵药材之一,人参具有调节中枢神经系统、改善心脏功能、降血糖作用、增强机体的免疫功能、抗肿瘤、抗氧化等作用,因而自古以来就被作为名贵的补品。
人参以其特殊的医疗保健功能,得到充分的开发利用,如今人参加工产品种类越来越多,如人参保健品、人参药酒等,但是大量废弃的根渣中仍含有丰富的活性成分。人参多糖(ginseng haride,GPS) 作为人参的主要活性成分之一,具有提高肌体免疫力、抗肿瘤、降血糖以及调控血细胞生成的作用[2]。国内测定多糖含量常用硫酸蒽酮和硫酸苯酚分光光度法,但误差较大,现有的比色重现性差,受影响因素多,尤其蒽酮试液加热后对最大吸收峰影响较大。高效液相色谱法是在经典的液相色谱基础上发展起来的一种高效、高速、高灵敏度的分析方法,目前其应用已超过气相色谱法[3]。本文采用高效液相色谱法对人参渣中的人参多糖进行定量分析,为综合开发利用人参的新途径提供科学参考依据。
1 仪器与试剂
Agilent technologies1200型高效液相色谱仪(美国Agilent公司);光电二极管阵列检测器;N2000 色谱数据工作站;UV2500型紫外可见分光光度计(日本岛津公司);TGL16G高速冷冻离心机(香港力康发展有限公司);KQ250B超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)。D无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所,批号:1108332200302,供含量测定用);甲醇(HPLC级,美国Tedia公司);人参渣为保健品公司产品加工后的人参渣废弃物。
2 方法与结果
波长选择
称取D,置于100ml容量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,用紫外分光光度计在200~400nm波长范围内扫描,分析紫外吸收图谱可见,葡萄糖在214nm处有最大吸收峰,因此选择此处为检测波长。
色谱条件
色谱柱Nova Pak C18 (150mm×,4μm,美国Waters公司);流动相为水甲醇(1∶1),;流速为1ml/min;柱温30℃;检测波长为214nm;进样量为20μl。在上述色谱条件下,D。
对照品溶液的制备
精密称取一定量的经80℃干燥至恒重的D无水葡萄糖对照品,加流动相制成浓度为10mg/ml的对照储备溶液。
供试品溶液的制备
将人参渣经60℃减压干燥24小时后,粉碎、过筛,得到100目的人参渣粉。加适量纯净水常温浸泡1小时,加热至45℃,超声波功率200W,超声提取30min,过滤后将滤液浓缩至原体积的1/3,向浓缩液中加乙醇使含醇量达85%,静置12小时,离心(3000r/min)15min,弃去上清液,取沉淀物于恒温干燥箱中干燥后即得多糖粗品。将所得多糖粗品溶于适量