文档介绍：司一洲(单位:山西大学工程学院。地址:太原市杏花岭区。邮编:030013)摘要: 目的探讨手霉素对白血病干细胞(LSC)的细胞毒作用。方法采用MTT法检测手霉素对LSC的细胞增殖抑制作用,采用AnnexinⅤFITC法检测LSC细胞凋亡情况并采用流式细胞术分析细胞周期。结果随着手霉素浓度的增高,LSC细胞增生抑制率明显增高,细胞凋亡率也逐渐增高,且阻滞于G2/M期的细胞比率明显增加。结论手霉素通过阻滞LSC于G2/M期,促进凋亡而抑制其增长,而对正常造血干细胞(HSC)无细胞毒作用。关键词:法尼基转移酶抑制剂;手霉素;白血病干细胞;细胞增生;细胞凋亡Abstract:ObjectiveToprobeintothecytotoxiceffectofmanumycinonleukemicstemcell(LSC).Ⅴ,theinhibitoryrateofLSCproliferationhadobviousincrease,theapoptosisratealsograduallyincreased,andthecellratearrestedinG2/,buthasnocytotoxiceffectonnormalhemopoieticstemcell(HSC).Keywords:Farnesyltransferaseinhibitors;Manumycin;Leukemicstemcell(LSC);Cellularproliferation;Apoptosis 原癌基因Ras家族编码是与细胞增殖和生长有关的一些重要细胞信号途径的上游产物,Ras基因突变导致Ras激活并具有致癌性,翻译后的Ras蛋白的关键环节是经法尼基转移酶的法尼基化〔1〕。此酶的抑制剂首先被用于抑制Ras突变肿瘤的治疗。手霉素作为法尼基焦膦酸脂(FPP)的模拟物,具有竞争性结合法尼基转移酶的作用,具有一定的抗肿瘤作用〔2〕。本研究拟观察手霉素对白血病干细胞(LSC)的细胞毒作用。1资料与方法、药品与主要试剂选择本院血液肿瘤科初诊、复发或难治急性髓系白血病(AML)患者10例,其中男6例,女4例;年龄21~58(中位数39)岁。手霉素、MTT、碘化丙啶(PI)、AnnexinⅤFITC凋亡试剂盒均购自Sigma公司。10%胎牛血清购于美国Gibco公司。 ,无菌抽取骨髓2~3ml,常规方法分离单个核细胞,然后利用免疫磁珠法分离LSC细胞(CD34+CD38)。