文档介绍：免疫组化结果的分析和判断第一节第一节免疫组化结果的判断原则免疫组化结果的判断原则免疫组化结果的判断原则概括起来有免疫组化结果的判断原则概括起来有以下几点以下几点??必须同时设对照染色必须同时设对照染色。。没有对照染色的没有对照染色的免疫组化染色结果是不可信的免疫组化染色结果是不可信的。。??抗原表达必须在特定部位抗原表达必须在特定部位。。A及及pp5353蛋白应定位在细胞核内蛋白应定位在细胞核内EMAEMA应应定位在细胞膜上定位在细胞膜上等等等等。。不在抗原所在部不在抗原所在部位的阳性着色位的阳性着色一概不能视为阳性一概不能视为阳性。。??阴性结果不能视为抗原不表达阴性结果不能视为抗原不表达由于检测方法灵敏度有高低之分由于检测方法灵敏度有高低之分有有时可因染色方法灵敏度不够时可因染色方法灵敏度不够而导致阴性而导致阴性反应反应判断时应注意判断时应注意。。??尽量避开出血尽量避开出血、、坏死及切片刀痕坏死及切片刀痕和界面边缘细胞的阳性表达和界面边缘细胞的阳性表达特别是酶特别是酶免疫标记免疫标记。。因为这类阳性着色多系内源因为这类阳性着色多系内源干扰干扰或系人为因素所致或系人为因素所致。。??对免疫组化标记结果的意义不能绝对化对免疫组化标记结果的意义不能绝对化应结合临床资料应结合临床资料、、XX线等影像学及实验结果线等影像学及实验结果综合分析综合分析。。一一对照染色的目的对照染色的目的设对照的目的是为了排除假阴性和假阳性设对照的目的是为了排除假阴性和假阳性。。假阴性的原因主要有三假阴性的原因主要有三??组织处理不当组织处理不当抗原丢失过多或被遮蔽抗原丢失过多或被遮蔽??抗体失活抗体失活、、效价过低或稀释度不合适效价过低或稀释度不合适主要指一主要指一抗抗即特异性抗体即特异性抗体??染色步骤遗漏及差错染色步骤遗漏及差错或显色剂的选择或显色剂的选择、、缓冲液缓冲液的的pHpH和离子强度不当等和离子强度不当等。。假阳性均系由多种因素造成的非特异假阳性均系由多种因素造成的非特异着色所致原因主要有着色所致原因主要有?自发荧光或内?自发荧光或内源酶等干扰?抗体试剂不纯源酶等干扰?抗体试剂不纯特别是一特别是一抗?操作失误如污染、切片干枯或抗?操作失误如污染、切片干枯或显色剂操作不当等?显色剂操作不当等?FcFc受体的干扰等受体的干扰等等。等。二二对照的种类及其选用目的对照的种类及其选用目的对照染色大致可分为对照染色大致可分为四大类阳性组织对照、阴性组织对照阴性试剂对照自身对照??阳性组织对照阳性组织对照指用已证实含有靶抗原的同源及不同指用已证实含有靶抗原的同源及不同源组织切片或细胞涂片与待检实验切片同源组织切片或细胞涂片与待检实验切片同时作同样处理和免疫染色的组织对照时作同样处理和免疫染色的组织对照。。正正确的结果应呈现阳性确的结果应呈现阳性目的是为了证实所目的是为了证实所用免疫组化染色流程的有效性用免疫组化染色流程的有效性排除假阴排除假阴性的可能性的可能。。??阴性组织对照阴性组织对照指用已证实不含靶抗原的同步处理和指用已证实不含靶抗原的同步处理和免疫标记染色的组织对照免疫标记染色的组织对照。。正确的结果正确的结果应为阴性应为阴性目的是除外假阳性目的是除外假阳性。。??阴性试剂对照阴性试剂对照是指用于证实在免疫组化染色中所用试是指用于证实在免疫组化染色中所用试剂剂尤其是