文档介绍：:..定量分析和定性分析的方法众所周知,紫外可见分光光度计是一种应用很广的分析仪器。当前它已成为全世界历史最悠久、使用最多、覆盖面最广的分析仪器。它的应用领域非常广泛,己是制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、商检、牛命科学、材料科学、计量科学、农业科学、林业科学、渔业科学等领域中的科研、教学、生产工作中,使用最多的分析仪器。它的应用主要有定性分析、纯度检查、参与结构分析、参与定性分析、氢键强度的测定、络合物组成及稳定常数的测定、反应动力学研究等,特别在有机分析屮应用非常广泛。本节将对紫外可见分光光度计在定量分析、定性分析、纯度检查、结构分析等方面的应用,作一简单讨论。一、定量分析方法定量分析是紫外可见分光光度计应用中的最主要用途。本节简要介绍7种定量分析方法,及英具体应用实例。(1)绝对法目前,绝对法是紫外可见分光光度计诸多分析方法中使用最多的一种方法。这是一种以比耳定律A=ebc为基础的分析方法。某一物质在一定波长下的£值是一个常数,石英比色皿的光程是己知的,也是一个常数。因此,可用紫外可见分光光度计在Xmax波长处,测定样品溶液的吸光度值A。然后,根据比耳定律c=A/(eb),则可求得该样品溶液的含量或浓度。(2)标准法在选定的波长处,在相同的测试条件下,分别测试标准样品溶液c标和被测试样品溶液(样的吸光度A标和A样。然后,按下式求得样品溶液的浓度或含量。 (3)比吸收系数法在药物分析中,经常采用比吸收系数法。其原理如下式所描述:式中,为标准物质的比吸收系数,可通过实际测试得到,或从有关手册中查到;为被测样品的碑吸收系数。例如,纯痢特灵的A(367nm)=746,在相同的测试条件下,%,:(739/746)X100%=%o 比吸收系数法多用于测定样品溶液的浓度。但是,根据比耳定律,被测试样溶液的浓度与吸光度应呈直线关系,而在实际测试中如果试样的浓度较高现实际测量到的吸光度值偏离线性关系。这种离比耳定律的原因,是由于紫外线可见分光光度计的杂散光、噪声、基线平直度和光谱带宽以及试样的前处理、玄年的化学平衡等所引起的。因此,一般情况下,不采用这种方法。(4)标准曲线法紫外可见分光光度计最常用的定量分析方法是标准曲线法。首先,用标准物质配制一定浓度的溶液,然后,将该溶液配制成一系列的标准溶液。在一定波长下,测试每个标准溶液的吸光度,以吸光度值为纵坐标标准溶液对应的浓度值为横坐标,绘制标准曲线。最后,将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值,在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量: ?•%。当摩尔吸收系数£为105L/()>光程为lcm>浓度为lX10-6?-5mol/L时,?。再低一点的浓度也能检测出来,但主要取决于仪器的噪声。有时因为仪器的噪声限制,样品过稀时测量的准确度和重复性都很差。还要注意的是,