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武汉植物学研究,:~
从一种富含藻胆蛋白的螺旋藻中大量
提取和纯化藻蓝蛋白的研究
胡一兵。胡鸿钧李夜光耿亚红
.中国科学院武汉植物研究所,武汉;.湖北民族学院生物科学与技术学院,恩施
摘要:采用新鲜藻丝为原料和分段梯度盐析分离纯化钝顶螺旋藻一的藻蓝蛋白,经羟基磷灰
石一次层析,能使提取的的纯度大于普遍认可的标准。由于该工艺流程较为简单,适合藻蓝蛋白的大量生产
。藻
胆蛋白经凝胶过滤后的可达电泳纯度标准。经—测得, 的分子量分别约为.
。
关键词:钝顶螺旋藻;藻蓝蛋白;别藻蓝蛋白;分离纯化
中图分类号:;. 文献标识码: 文章编号:———
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螺旋藻是丝状的多细胞蓝藻,因含有多种对人定的限制。
体有益的营养物质而受到广泛的关注,其突出特点螺旋藻一是经过自然筛选得到的
是氨基酸种类齐全且蛋白质含量高,其中含量最高一个富含藻蓝蛋白的品系引,其藻胆蛋白含量高达
的藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白一直是基础干重的.% ,明显高于美国公
研究的热点,因为它们不仅在光合作用的原初反应司生产的螺旋藻藻胆蛋白,这一品系在武汉
机理的探索方面有重要意义,而且可以作为生物地区已实现工厂化生产,为商业化生产藻胆蛋白提
体内的荧光示踪物质,作为天然的色素蛋白也具有供了优质原料。由于已报道的藻胆蛋白分离纯化方
十分广阔的应用前景。但由于分离纯化的困难,现法复杂,导致生产成本太高无法大量制备以满足潜
有的藻胆蛋白商品价格昂贵,使它的应用受到了一在的市场需求。本研究的目的就是探讨一种简单有
收稿日期:—,修回日期:——。
作者简介:胡一兵一,男,硕士,讲师,研究方向为藻类生理及生化。
通讯作者。
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武汉植物学研究第卷
效的适合大量制备的分离纯化藻胆蛋白的方法,、浓缩以备进一步纯
对藻胆蛋白性质作初步的分析。化。同样的方法处理,
材料和方法部分。
. 凝胶层析
. 藻种
一过滤后分部收集纯度比大于
钝顶螺旋藻一由中国科学院武汉
.的部分,浓缩、透析、冷冻干燥,以备电泳。同样
植物研究所经济微藻藻种库提供。
的方法处理。
. 培养和收集
分。
用培养基通气培养,待藻液的值
. —电泳
。,过滤收集藻丝,洗涤干净后移
标准分子量为公司的产品。采用垂
入三角瓶中
直板状不连续电泳系统,分离胶浓度为. ,浓
. 细胞破碎
缩胶浓度为. ,恒流。
在三角瓶中加适量的直径. 的玻璃球,电
磁搅拌器搅拌。搅拌过程中保持低温,并用超声波处结果
理破碎细胞. 藻胆蛋白的提取
. 水溶性蛋白的提取新鲜藻丝经破碎,离心, 的纯度比为.;
将破碎的细胞悬液在高速冷冻离心机上离心, 。
弃去沉淀。上清液在下离心,弃去表、纯化结果
沉淀。上清液即为水溶性蛋白溶液。
. 盐析
将上清液加入固体。使之达到