文档介绍：谷氨酸生产菌的育种及扩大培养110603010张迎丰谷氨酸的育种:依据谷氨酸生物合成途径和代谢调节机制及高产谷氨酸应具备的生化特征,筛选出我们所需要的菌株,从而加入到生产中谷氨酸的育种大致可分为两类:一、通过不同培养条件,经过检测后,筛选出有用的菌株,称之为代谢控制育种;二、随着分子生物学和分子遗传学的发展,原生质体融合法、重组DNA技术等一系列新的育种方法被开发,这也为谷氨酸的选育带来了另外一方面的生机,将其称为生物工程新技术选育。一、代谢控制育种代谢控制育种有多个方向,可以根据谷氨酸生物本身应具备的生化特征、谷氨酸生物合成途径、(1)日常菌种工作:定期分纯:筛选出产酸高、生长快的纯菌小剂量诱变刺激:淘汰部分菌株,激发溶原性噬菌体再次提纯高产菌制作安瓿管:保存(2)选育耐高渗透压菌种:能够在高糖、高谷氨酸(高渗透压)的培养基中正常生长、代谢的能力(3)选育不分解利用谷氨酸的突变株:尽量减弱α-***戊二酸被氧化。以谷氨酸为同一碳源的菌体不能生长或生长微弱(4)选育细胞膜渗透性好的突变株:通过改变谷氨酸生产菌膜的渗透性,使谷氨酸不断从细胞内渗透到细胞外抗Vp类的衍生物:通过药物遗传性的改变细胞膜的通透性选育溶菌酶敏感性突变株,选育二氨基庚二酸缺陷突变株:改变细胞壁的保护作用,渗透性增大选育温度敏感突变株:可通过控制温度来控制谷氨酸的合成以上为高产谷氨酸应具备的生化特征的菌株的筛选条件、?(1)选育强化CO2固定反应的突变株通过CO2固定产生四碳二羧酸,比乙醛酸循环提供,对糖的理论转化率要高。因此,强化CO2固定反应能提高菌种的谷氨酸产酸率及糖酸转化率。①用以琥珀酸为唯一碳源的培养基;②选育******酸敏感性突变株:抑制***酸向乙酰CoA的转化;③选育***酸缺陷、天冬氨酸缺陷突变株;④克隆***酸羧化酶基因(2)选育减弱乙醛酸循环的突变株四碳二羧酸是由CO2固定反应和乙醛酸循环所提供的,减弱乙醛酸循环,CO2固定就会增大,谷氨酸的产率就高。(与上个方法相似)①选育琥珀酸敏感型突变株:降低异柠檬酸裂解酶的合成能力②选育不利用乙酸的突变株:以醋酸为唯一碳源③利用基因工程技术,降低异柠檬酸裂解酶的的活力(3)选育强化三羧酸循环中从柠檬酸到α-***戊二酸代谢的突变株可选育柠檬酸合成酶强的突变株;选育抗***乙酸、***化钠、氮丝氨酸和***柠檬酸等的突变株(4)选育解除谷氨酸对谷氨酸脱氢酶反馈调节的突变株α-***戊二酸会能够合成谷氨酸和天冬氨酸,谷氨酸优先合成,可当谷氨酸达到一定的量后会反馈抑制谷氨酸脱氢酶,使反应合成天冬氨酸可选育***基丙二酸抗性突变株;选育耐高谷氨酸突变株;选育谷氨酸结构类似物抗性突变株;选育谷氨酰***抗性突变株(5)选育强化能量代谢的突变株以下两点使谷氨酸发酵的能量不足:①α-***戊二酸不再向下反应,之后产生能量的途经消失;②TCA循环途径前面部分反应缓慢可选育呼吸抑制剂抗性突变株;选育ADP磷酸化抑制剂抗性突变株;选育抑制能量代谢的抗生素的抗性突变株