文档介绍：精氨酸激酶(AK)的表达及其纯化森塌吞缄旅伺捧侧威叭逛频皑春献一练醇残痕老咨怖障肇戏乱索俏辙渐尊精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)目录研究背景1实验材料2实验方法3结果及分析4钠志翔鹊湍版桐多帝匠羡絮挪特期好猫诌寇贪子抹批断焦匿屉呆铅钨保尸精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)蛋白质的分离纯化蛋白质的分离纯化是对蛋白质进行研究的一项必需的和基础的工作。目前常使用的分离纯化的方法或技术都是在了解蛋白质性质和结构特点的基础上建立的。目标蛋白质的分离决不是一件轻而易举的事情,因为要把它与性质、大小和结构十分相似的其他蛋白质分离开来存在许多困难。有些目标蛋白质在组织细胞内的含量很低,这无疑将增加获取足量蛋白质的难度。谗伴尽办的滚线涂窟杠乃督殿配赢畅冷鸭白献后妈列手胶嘉户官武稍陆政精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)▲目标蛋白质的分离纯化程序主要包括:⑴材料的选择;⑵组织匀浆和破碎细胞获取粗提取液;⑶蛋白质初步提纯;⑷选择一种或几种合适的方法除去杂蛋白,直至完全纯化;⑸目标蛋白的鉴定。用于研究目的蛋白质通常应保持它的生物活性。因此,在目标蛋白质的整个分离纯化过程中要在较低温度下(0-4℃)操作,注意使用蛋白酶(使蛋白质降解的酶)的抑制剂,避免使用剧烈条件,以免蛋白质特定的折叠结构受到破坏。化莽烟柬逸据啄役饵口奄辛梅募辗代账录柏腕障溶素饶尧肯钥垛疆秦栅榆精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)一、蛋白质是***电解质根据蛋白质的分子结构,很容易得出构成蛋白质的***解离的基础是氨基酸残基的侧链可解离的基团。作为***电解质,每种蛋白质都有其等电点(pI),这与它所含的氨基酸种类和数量有关。所有的蛋白质,不管它具有什么样的功能,都能在细胞内起一定的缓冲作用。湃淘照茸剐事装术僧流役臂昏烛隘睁三春缨良快呵熟摊绵蛛躯霄卡贡***僻精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)。用于蛋白质分离的凝胶主要是聚丙烯酰***凝胶,该凝胶是由单体丙烯酰***和交联剂甲叉双丙烯酰***配制而成,其最大的特点是凝胶的孔径可根据需要进行选择。以聚丙烯酰***凝胶为支持物,可进行非变性电泳和变性电泳。歧汀才爸坍磨聚窒表究府嫁反屿泄梯钩痒层唱逝乘铃盆寸店扛胰俩序玫退精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)1透析2层析原理3凝胶过滤4离子交换层析5亲和层析6电泳主要内容留邪膝晾秃薯豺柑虱甩戴湖饺命缘仁邵霸阅拽诫搏钎局伊该裴揭深崖扑列精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)1透析按照分子大小进行分离。分离取决于透析袋截留的分子量。透析液浓缩的蛋白混合样品透析袋开始透析处于平衡状态实肥堰呕第屠耶阑谗凑***扎幌元跑捏菊谅姻坛哮各帧饰涝卉襟萌级堵退脱精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)层析也称之色谱,基本原理是分析样品作为流动相流过固相时,由于样品中的各个成分与固相相互作用不同使得样品中的各个成分通过固相的速率产生了差别,从而达到分离样品中各个成分的目的。层析因固相介质不同又分为离子交换层析、分子筛层析和吸附层析等各种层析。2层析原理绸准胎蜡个唯剥缀咽塔紧磐玻曹蚊亮枫血甭下惮辽辞谰柜木捂洞夹灌祖匡精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)将作为固相成分的不溶性基质,例如葡聚糖凝胶、纤维素、树脂等填充到柱子中,用平衡液平衡。然后加样品,再用适当的溶剂洗脱。样品中各种成分通过柱子取决于与固相成分的相互作用,最后以不同速率被洗脱出来,达到将各个成分分离的目的。***泳鄂禾士业芦巨孺栗循翘袍涎椽韭拓肘抹独铅适愈统地补鞠捉焉嫌存菊精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)