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核酸检测试剂盒(定磷法).doc

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核酸检测试剂盒(定磷法).doc

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核酸检测试剂盒(定磷法).doc

文档介绍

文档介绍:核酸检测试剂盒(定磷比色法)简介:核酸(nucleicacid)是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,是生命的基本物质之一,广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内,根据化学组成不同,核酸可分为脱氧核糖核酸(简称DNA)和核糖核酸(简称RNA)。核酸分子中含有一定比例的磷,%,%Leagene核酸检测试剂盒(定磷比色法)检测原理是在强酸条件下,核酸分子中的有机磷转化为无机磷,后者与钼酸铵形成黄色的磷钼酸铵,随后还原剂把高价钼离子还原成低价钼离子,进而形成蓝色的钼蓝,在一定浓度范围蓝色深浅与磷含量成正比,通过分光光度计检测吸光度,通过检查标准曲线,获得磷含量,如果待测样品中有无机磷,应予以扣除,否则结果偏高。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。组成:编号名称TC135150TStorage试剂(A):磷标准(1mg/ml)1ml4℃试剂(B):玻璃珠50粒RT避光试剂(C):H2O22×1mlRT试剂(D):定磷试剂E1:定磷试剂A50mlRTE2:定磷试剂B20mlRTE3:定磷试剂C20ml4℃避光临用前,按E1:E2:E3混合,配制定磷试剂,即配即用。使用说明书1份    自备材料:1、蒸馏水、浓硫酸2、离心管或试管3、容量瓶4、凯氏烧瓶5、水浴锅6、722型分光光度计操作步骤(仅供参考):1、稀释标准品:取磷标准(1mg/ml),按磷标准(1mg/ml):蒸馏水稀释标准品。取干净离心管或试管,按下表进行标准品浓度的依次稀释,获得不同浓度的多个磷标准。 012345678磷标准(20μg/ml)/.          2、制备待测样液:取样品(如核酸粗提物),加入少量蒸馏水溶解(如果难以溶解,可滴加样品处理液至溶液pH=),准确定容至(此溶液样品含量2mg/ml),即为待测样液。3、制备总磷测定液:取上述待测样液(2mg/ml),置于凯氏烧瓶,加入浓硫酸和一粒玻璃珠,凯氏烧瓶内插入一个小漏斗,放在通风橱内加热至溶液呈黄色时取出,稍冷却后加入H2O2,继续消化至透明,表示消化完成。冷却,转移消化液至容量瓶中,用少量蒸馏水洗涤凯氏烧瓶2次,洗涤液一并倒入容量瓶,加蒸馏水定容,混匀后待用,即为总磷测定液。4、无机磷测定液(选做):取上述待测样液(2mg/ml),置于容量瓶中,加蒸馏水定容,混匀后待用,即为无机磷测定液。5、磷测定:按下表进行操作,依次加入下列溶液,如果样品中有无机磷,应同时检测无机磷,并将无机磷扣除。加入物(ml)标准管无机磷测定管(选做)--无机磷测定液-

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