文档介绍：摘要建立了实用的肌酐酶法测定方法,通过实验将比色测定终点法改为两点法,使其适合自动分析,并节省工具酶。本法的线性为0~2749μmmol/L,精密度:手工操作,批内CV<3%,总CV<5%。%~%间,%~%。本法(Y)和BM的试剂(X)比较:Y= X+,r=。关键词肌酐;酶法;olorimetryforcreatinineassayYANGChangguo,LUBangtai,XUYe,etal(NingboCenterforClinicalLaboratory,NingboZhejiang 315000)Abstract :lineritywas0~2749μmol/L;totalCVandwithin-runCVwere≤%and≤%respectivelyformanual,andwithin-%~%forthreeautoanalyzer,%~%,correlationbetweenresultsbythismethod(Y)andBM′sreagent(X)wereY=+,r= creatinine;enzymaticmethod;towpointassay 酶法测定肌酐目前已报告的有四条途径[1~5],其中三种为紫外测定,一种为比色测定。相比之下比色测定具有更多优越性,商品试剂盒多采用此法。但Fossati原法[]的反应时间较长,且要做一血清空白以除去血清中肌酸的干扰,因此不适合自动分析。自动分析一般总反应时间为10分钟,为了除去肌酸的干扰必须采用两步法,反应要求5分钟内达到终点。据我们实验,必须将几种工具酶的用量增加到Fossati原法的5~10倍。在实验过程中我们还发现几种工具酶的水解速率均较缓慢,反应的线性时间较长,因此将其改成两点法或速率法测定,取得很好的结果。1 原理第一步反应:排除肌酸干扰第二步反应:测定肌酐肌酸反应同第一步。2 仪器自动分析仪HITACHI7170,BeckmanSynchron△CX5和CibaCoringExpressPlus。分光光度计BeckmanDU-640。 原料试剂肌酐酰氨基水解酶(Cretininase,CRNase);肌酸脒基水解酶(Creatininase,CRTase);肌氨酸氧化酶(SO);棘根过氧化物酶(POD),抗坏血酸氧化酶(ASO),均为BoehringerMannheim公司产品。3,5-二***-2-羟-苯磺酸(DHBA),