文档介绍：
分泌性高表达组织激肽释放酶 7 前列腺癌细
胞株的构建#
莫林键1,2,3,林志弟1,2,3,刘坤1,2,张成东1,2,宣强1,2,张悦宁1,2,腾若冰2,3,莫曾
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南2,4,杨小丽1,2**
(1. 广西医科大学医学科学医学科学实验中心;
2. 广西医科大学第一附属医院泌尿科学研究所;
3. 广西医科大学第一附属医院泌尿外科;
4. 广西医科大学基因组与个体化医学研究中心)
摘要:目的构建人组织激肽释放酶 7 基因(KLK7)真核表达载体,建立稳定高表达分泌
性 KLK7 蛋白(hK7)的前列腺癌细胞株 DU145 。方法
PCR 扩增 KLK7 ORF, 克隆到真
核表达载体 上;限制性内切酶酶切、DNA 测序验证正确后,以脂质体法转染
人前列腺癌细胞 DU145;通过 G418 筛选,每个单克隆细胞扩大培养,建立稳定转染 KLK7
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的 DU145 单克隆细胞株;通过 Western blot 检测细胞培养液中 hK7 蛋白的表达。结果
成
功构建 -KLK7 真核表达载体;获得稳定高表达 KLK7 的前列腺癌单克隆细胞株,
在细胞上清液中检测到 Hk7 蛋白的表达。结论 -KLK7 真核表达载体的建立及
稳定高表达分泌性 Hk7 的前列腺癌单克隆细胞株的建立,为研究 hK7 在前列腺癌致病机理
中的作用提供了条件。
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关键词:hK7;前列腺癌;稳定细胞株;表达载体;上清液;DU145
中图分类号:请查阅《中国图书馆分类法》
Establishment of a human prostatic carcinoma cell line
stably
MO Linjian1,2,3, LIN Zhidi1,2,3, LIU Kun1,2, ZHANG Chengdong1,2, XUAN Qiang1,2,
ZHANG Yuening1,2, TENG Ruobinga2,3, MO Zengnan2,4, YANG Xiaoli1,2
(1. Medical science experiment center of Guangxi Medical University;
2. Research of the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University Institute of Urology;
3. Department of Urology, the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University;
4. The Guangxi Medical University genomics and personalized medicine research center)
Abstract: Objective To construct the eukaryotic expression vector containing Kallikrein 7
(KLK7) and establish stably cell line with hi