文档介绍：专题3 植物组织培养技术课题课题1:1:月季的花药培养月季的花药培养一、基础知识一、基础知识(一):??(2n)4个小孢子(小孢子四分体)(n)减分有分1个花粉管细胞核(n)1个生殖细胞核(n)有分2个精子单核居中期(n)单核靠边期(n)(二)产生花粉植株的两种途径快速阅读P38页有哪两种途径?原因是什么?:主要取决于培养基中种类及其浓度配比。:植株,植株弱小,。激素单倍体高度不育思考:思考:?为什么愈伤组织和胚状体到丛芽称为分化和再分化?,高度不育,是否就没有利用价值?花粉植株弱小,高度不育,是否就没有利用价值??,高度不育,是否就没有利用价值?用于单倍体育种技术,可明显缩短育种周期,培育纯合新品种。胚状体就像种子,有胚芽、胚轴、胚根等结构。胚状体到丛芽就是由原始的分化状态继续生长和分化完成的。而愈伤组织形成丛芽的过程是从脱分化状态进入再分化形成丛芽的过程。(三),为什么????阅读P38-39思考:诱导花粉植株能否成功及成功率的高低,主要影响因素是和。培养基的组成材料的选择花期为初花期,花粉发育在单核靠边期,成功率最高。选择完全未开放的花蕾亲本植株的生长条件、材料的预处理及接种密度等。花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。(一)材料的选取: 染色镜检2. 针对不易着色的花粉细胞核,采用的方法是:。花粉细胞核被染成色。。机理:醋酸洋红为性染色剂,易被碱性染料着色染成红色。二、实验操作二、实验操作醋酸洋红法焙花青-铬矾法蓝黑碱染色体碱性染料不是通常所说的酸碱性,而指染料中着色基团是阴离子/阳离子,若为阳离子则为碱性染料。(二)材料的消毒(无菌吸水纸)吸干水分(%氯化汞溶液)2~4min(无菌水)冲洗花蕾(70%酒精)大约30s(无菌水)清洗1. 与菊花外植体的消毒相比较,有何不同?为什么?在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。因为月季花蕾外面有花萼、花瓣或颖片保护,通常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。?花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料消毒带来困难。(三)接种和培养思考:1、为何不能损伤花药且要彻底去除花丝?2、培养时需要注意哪些事项?②与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体形成①损伤花药,容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织,即得不到单倍体。②花药开裂长出愈伤组织或释放出胚状体。长出的愈伤组织要及时转移到分化培养基上;释放的胚状体,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,否则这些植株将很难分开。①温度在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成后才需光照。③在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常常会出现染色体倍性的变化。(主要原因是营养核和生殖核融合造成的)所以还需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选