文档介绍：分子克隆工具酶在基因工程的实际操作中,工具酶的使用是一项基本技术。用于基因工程的工具酶种类繁多、根据其功能可粗略分为限制酶、连接酶、聚合酶和修饰酶4类。工具酶类 主要用途限制性核酸内切酶 切割DNA分子形成片段DNA连接酶 DN***段的连接重组大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ 切口平移法标记DNA探针T7DNA聚合酶 DNA序列测定分析TaqDNA聚合酶 PCR体外扩增技术多核苷酸激酶 末端标记法制备探针S1核酸酶 去除双链DNA的局部单链常用工具酶与基因克隆技术核酸酶是通过切割相邻的两个核苷酸残基间的磷酸二酯键,导致多核苷酸链共价键断裂的一类水解酶,可分为核糖核酸酶(RNase)和脱氧核糖核酸酶(DNase)。按其水解断裂核酸分子的不同方式: 核酸外切酶(exonuclease):从核酸末端顺次水解磷酸二酯键核酸内切酶(endonuclease):(restriction)与修饰(modification)现象: 人们发现侵染大肠杆菌的噬菌体都存在着一些功能性障碍。λ噬菌体在感染某一宿主后,再去感染其他宿主时会受到限制。即所谓的寄主控制的限制与修饰现象简称(R/M体系)。细菌的R/M体系类似于免疫系统,能辨别自身的DNA与外来的DNA,并能使后者降解。,Ⅰ型限制酶;1970年,Smith等人首先从流感嗜血杆菌d株中分离出HindII。限制性内切酶将侵入细菌体内的外源DNA切成小片断。限制(Restriction)细菌自身的DNA碱基被***化酶***化修饰所保护,不能被自身的限制性内切酶识别切割。①Dam***化酶GATC腺嘌呤N6位置引入***。②TGG序列在第二个C上C5位置上引入***。修饰(Modification)