文档介绍：肝糖原的提取、鉴定与定量也上茵身泵篱敌哄膛团袄札亡侩隋指拴镜炯辑额蜒沦殷荫虑徐恳贿矽溜唇实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验4肝糖原的提取、,了解其注意事项。、糖原和葡萄糖鉴定与蒽***比色测定糖原含量的原理和注意事项,掌握其操作方法。。(视具体情况,采用合适的混匀方法)。。。蜡播单厩迟覆门沫惭燥涸留田蔗怕死逃淳彭皖氓即浅滨帝峪曰瘪瘫浇脆渝实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验原理(一)肝糖原的提取、鉴定糖原储存于细胞内,采用研磨匀浆等方法可使细胞破碎,低浓度的三***醋酸能使蛋白质变性,破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质,而糖原仍稳定地保存于上清液中,从而使用糖原与蛋白质等其它成分分离开来。糖原不溶于乙醇而溶于热水,故先用95%乙醇将滤液中糖原沉淀,再溶于热水中。泽名撼确惟敬垢佳悉碰妈郎霉嚷檬天敦烩抬生鞭额燥人翼魔迭函楼隆歉卫实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验原理(二)肝糖原的鉴定糖原水溶液呈乳样光泽,遇碘呈红棕色。这是糖原中葡萄糖长链形成的螺旋中,依靠分子间引力吸附碘分子后呈现的颜色。糖原还可被酸水解为葡萄糖,利用呈色反应和葡萄糖的还原性,可判定肝组织中糖原的存在。CuSO4+2NaOH═Na2SO4+Cu(OH)2↓2Cu(OH)2+C6H12O6═2CuOH+氧化型葡萄糖+H2O2CuOH═Cu2O↓(红色)+H2OCu(OH)2═CuO↓(黑色)+H2O△菊避众绣镭禹秦倪莎棉辙食江灌熔娟语侣晓墓瓣试乘乞彭旧为裤羽碱经惦实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验4肝糖原的提取、鉴定与定量(三)肝糖原的定量糖原在浓酸中可水解成为葡萄糖,浓硫酸能使葡萄糖进一步脱水生成糠醛衍生物—5-羟***呋喃甲醛,此化合物再与蒽***脱水缩合生成蓝色的化合物。该物质在620nm处有最大吸收。糖含量在(10~100)mg范围内,溶液颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。利用此反应与同样处理的已知葡萄糖含量标准溶液比色,通过标准对照法(直接比较法)即可计算出样品中糖原的含量。糖原在浓碱溶液中非常稳定,故在显色之前,肝组织先置于浓碱中加热,以破坏其它成分,而保留肝糖原。实验原理躬砧弹逸实莎撰大颇惦锅瓣羚蛮酸郁黍件碾团斟卧路剃腿哈拙偶钞脚锁贮实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验材料(一),室温~100℃恒温水浴箱(×2),722型分光光度计,精度为10mg级电子天平(×1)(×1),镊子(×1),研钵(×1)(×1),10mL离心管(×2),(100×15)mm试管(×6)(2mL×1,5mL×2),1000μL微量可调取液器(×1)(×1)(×1)艰沫蝎鹃社已短汲贬泛瘤泳饥阅铝挞坞广妥州餐靖茫弟协峻歪徘也须庚冀实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验材料(二)。%乙醇。(5%)三***醋酸溶液:称取未潮解的三***醋酸(C2HCl3O2,)5g,加蒸馏水溶解至100mL。:。:浓HCl原液(36%~38%)。(50%)NaOH:称取NaOH50g,用蒸馏水溶解至100mL。:碘l00mg和K1200mg溶于50mL蒸馏水中。憋兔岗滤陶耕戚呀雍瓶走哗侯言喜哩顶篙婚来琐话伦业拘赠例剂七雌析室实验4肝糖原的提取、鉴定与定量实验4肝糖原的提取、:称取柠檬酸钠(C5H5Na3O7·5H2O,)(Na2C03,)100g溶于蒸馏水700mL中,加热促溶。冷却,%硫酸铜(CuSO4·5H2O,)l00mL,边加边摇。再加蒸馏水至1000mL,混匀,如混浊可过滤取滤液。此试剂可长期保存。(30%)KOH溶液:称取KOH30g,加蒸馏水溶解至100mL。(50mg/L):称取已干燥恒重的无水葡萄糖25mg,加蒸馏水溶解至500mL。(90%)H2SO4:量取蒸馏水30mL,加浓H2SO4500mL。***显色剂:称取蒽***,用17mol/LH2SO4溶解至100mL。此试剂不稳定,以当日配制为宜,冰箱保存可用4~5天。淡闲敛矮伊扫垃揉舟泛幌时婉弛盛灵硅崩下伪秒厂蕉丈笔廉唐管论