文档介绍：外源雌激素处理对唐鱼卵黄蛋白原和雌激素受体基因表达的影响张为民 中山大学生命科学学院唐鱼(Tanichthysalbonubes)雄鱼雌鱼唐鱼唐鱼为鲤科(Cyprinidae)鱼丹亚科(Danioninae)唐鱼属(TanichthysLin,1932)仅分布于我国广州白云山一带山区小溪流中,濒危物种,属国家II级保护动物研究表明唐鱼对重金属Cu2+等敏感,是一种较理想的环境重金属污染指示生物Question唐鱼对环境雌激素污染是否也敏感?卵黄蛋白原卵黄蛋白原(VTG)是卵生动物中卵黄蛋白(yolkprotein)的前体,由1100多个氨基酸组成VTG经蛋白酶水解产生:卵黄脂磷蛋白I(lipovitellinI),卵黄高磷蛋白(phosvitin),和卵黄脂磷蛋白II(lipovitellinII)在鱼类、两栖类和鸟类中,VTG是在E2刺激下由雌性动物肝脏中合成的雄鱼肝脏在E2刺激下也能合成VTG雌激素受体广义的雌激素受体(estrogenreceptor,ER)包括雌激素膜受体、胞质受体和核受体雌激素核受体介导雌激素的基因组效应E2刺激VTG生物合成是由雌激素核受体介导的环境雌激素也可作用在雌激素核受体上影响动物内分泌平衡目的意义克隆唐鱼VTG和雌激素受体基因分析E2对雄性唐鱼这些基因表达的影响方法基因克隆采用3’和5’RACE方法基因表达分析采用半定量RT-PCR方法VTG:GTATGACAAAGATTAAGCGCACACTGAGAGCTCTTACAA697ADQSVDRMTKIKRTLRALTN(4171bp,1326aa,full-length)TGGATCGAGAAACAAATCAATGAAGCATAAGACGTGAAGCATTAAATTTTACACT1317SWIEKQINEA*TGCAGTTGAAAGACTGGAGACTGAAGATAAAAATCGACGTGTCTCTTCTGAAAGCA1017PAVERLETEDKNRRVSSESN1卵黄脂磷蛋白I卵黄脂磷蛋白II卵黄高磷蛋白卵黄高磷蛋白VTG:Nucleotideanddeducedaminoacidsequences