文档介绍：摘要伯乐树(露nz5(’hi7￡:,,出J’一∞’优Ⅵs,5¨E,ins].)又名钟萼木,属们乐树利,是我国特有的、古老的单种科和残遗利,,】999年被国家林业局列为幽家一级重点保护野生植物,目前该树种处于濒危状态。本文首先建立和优化了伯乐树】SSR反应体系,在此基础上利用ISSR和RAPI)分子标记技术对23份样品进行了遗传多样性研究:同时对伯乐树木材纤维形态特征的径向变异进行了分析。主要结果如下:1、采用单因素对比试验和正交优化试验研究模板DNA、TaqDNA聚合酶的用量,以及Mg”、dNTP、引物的浓度和退火温度对PCR扩增的影响。建立了适宜的ISSR—PCR扩增体系,即209L体系中含90ng模板DNA,1xPCRbuffer,‘’M92+,·L—dNTP,·L。引物,,退火温度因引物而异。2、通过引物筛选,分别得到的】3条ISSR和10条RAPD多态性引物。用于23份伯乐树样品PCR分析分别检测到79和57条扩增带,其中多态性条带分别为50和33条。,,,、,表明检测的样品具有较丰富的遗传变异。对比ISSR和RAPD在PCR反应中的稳定性和检测变异的能力表明,ISSR的实验稳定性优于RAPD,且ISSR能检测到比IIAPD更多的遗传变异。另外,我们推断人类活动的干扰和生境的片断化是导致伯乐栲i!ii危现状的主要因素之一。3、,,,,,木纤维长宽比平均值33;纤维长度、宽度、双壁厚、壁腔比、腔径比、长宽比都不同程度地随轮龄逐渐增加,9年后均变缓,9年之后,树龄对纤维长度与宽度影响不显著。关键词:伯乐树;RAPD;ISSR;遗传多样性;纤维形态;径向变异A13SlRAt_JABSTRACTBoleTree(BretschneideraSinensisHemsl.),,,theamplifiedsystemof1SSR—PCRforBretschneideraSinensiswereestablishedandoptimized,andtoprovidebiologicalfoundationfortheutilizationandbreedingofBretschneideraSinensis,:—PCR,suchasDNAtemplatesdosage,TaqDNApolymerasedosage,Mg”concentration,dNTPsconcentration,primerconcentrationandannealingtemperature,wereoptimizedusingsingle—:Experimentalresultsindicatedthatefficientsystemwasasfollows:20“1reactionsystemcontaining90ngtemplateDNA,1xPCRbuffer,·L一1M92+,·L~dNTPs,·L~primers,‘