文档介绍：目的:建立微生物限度检查法标准操作程序。2范围:用于原辅料、包装材料、中间产品以及成品的微生物限度检验。3责任:质量部。::通过对试样在不同条件下的微生物培养,检查试样受到微生物污染程度情况。微生物限度检查法系检查非灭菌原料药及其原、辅料受到微生物污染程度的方法,检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌的检查。微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作,防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。供试品检查时,如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂,应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。除另有规定外,本检查法中细菌培养温度为30℃~35℃,霉菌、酵母菌培养温度为20℃~25℃。检验结果的报告以1g、1mL、10mL或10cm2为单位报告。:产品取样必须依照规定的采样方法取样。在每批样品中取三个样品并分别检查。:在pH=***化钠-蛋白胨缓冲液中稀释10g或10ml产品。一般准备1:10稀释倍数,作为供试液。不过,根椐产品的特性或必要的敏感性也可做成其它的比例的。如果已知此产品有抗微生物活性,可加入灭活剂到稀释液中。如果需要调节pH值,调至pH值约为7,如果需要进一步稀释,用相同稀释液进行系列10倍稀释。,要用稀释剂代替供试液进行阴性对照试验。应无菌生长。对于不合格的阴性对照结果应进行调查。(阳性对照)适用于每一批购买的现成培养基,每一批使用脱水培养基制备的培养基或者按照指定成分配制的培养基。按照表1所示,接种少量的菌种(不多于100CFU)于大豆酪蛋白胰酶消化物肉汤和大豆酪蛋白胰酶消化物琼脂培养基中,每一份菌种接种于各自的培养基上。按照表1所示,接种少量的菌种(不多于100CFU)于沙氏葡萄糖琼脂培养基中,每一份菌种接种于各自的培养基上。在表1所示的条件下培养。对于固体培养基,得到的菌落数与标准接种体的数量相差应不超过2倍。对于新鲜制备的接种体,微生物的生长状况应该和以前的一批培养基(经过检测和验证的)所得到的微生物生长情况相当。如果和以前的一批培养基(经过检测和验证的)所得到的微生物生长情况相比有明显的变化,可以改用液体培养基。:,其截取细菌的有效性经过确认。在选择滤膜材质时,应确保供试品不影响细菌过滤或截留的的有效性。一种微生物使用一个薄膜过滤器。吸取按照规定方法制备的样品溶液适量,(一般都取相当于1g的样品溶液,如果预知细菌数量较多的情况下也可以吸取更少量的溶液)每个样品迅速过滤制备二个滤膜片,每个滤膜器都用大约100ml的适当液体,如pH=***化钠-蛋白胨缓冲液清洗三次。在溶液中,可以加入表面活性剂聚山梨酯80或抗微生物的灭活剂。如果通过验证,清洗次数也允许少于3次。对于总需氧菌的检测,将一个薄膜置于大豆酪蛋白胰消化物琼脂培养基上进行培养,培养温度为30℃~35℃,培养时间为3~5天。对于霉菌和酵