文档介绍：细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞的研究现状        关键词:细胞因子;杀伤细胞分类号: 文献标识码:A文章编号:1000-8578(2000)02-0157-03 从八十年代Rosenberg等[1]观察到在患非免疫系统肿瘤的动物中给予重组白细胞介素-2(rIL-2),动物的淋巴细胞可以调节肿瘤的消退和转移以来,细胞免疫治疗的临床领域就迅速扩展开来,人们先后研究了淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞[2],肿瘤浸润淋巴(TIL)细胞[3],CD3单抗激活的杀伤(CD3AK)细胞[4],但是由于细胞来源困难、细胞扩增倍数低或者细胞毒力不高等原因,上述细胞的临床应用受到极大限制,为此,美国斯坦福大学医学院骨髓移植研究中心1991年报道了具有高增殖能力和高细胞毒性的细胞因子激活的杀伤(CIK)细胞[5],本文就有关CIK细胞目前的研究状况作一综述。1 CIK细胞的制备[5] 使用密度梯度离心方法常规分离人外周血制备单个核细胞悬液,调整细胞浓度为1×106/ml进行培养,于培养第一天在培养体系中加入γ-干扰素(γ-IFN)1000u/ml,培养24小时后加入重组白细胞介素-2(rIL-2)300u/ml,重组白细胞介素-1(rIL-1)100u/ml,抗CD3单克隆抗体50ng/ml,以后每3天更换新鲜培养液和rIL-2,并调整细胞浓度至2×105/ml,这样制备的细胞称为CIK细胞。Wolf等人在研制CIK细胞时发现在培养的第15天细胞数增长754倍,而LAK细胞仅增长19倍,对CIK细胞培养30天的观察,发现细胞增殖高峰时间在第21-28天,细胞数可增长1000倍以上,通过[3H]胸腺嘧啶检测认为主要是抗CD3单抗起分裂原刺激作用而使CIK细胞增殖,γ-IFN和rIL-1对细胞增殖则不起作用,进一步研究细胞毒力时发现γ-IFN先于rIL-224小时加入培养体系可以提高细胞毒性,在体?系?中?联?合应用IL-1则可进一步提高细胞毒力,而γ-IFN与IL-2同时或在IL-2之后加入则降低细胞毒力,故各细胞因子加入的时间对CIK细胞有重要影响。2 CIK细胞的特征和来源 Wolf等[6]+%培养14天的CIK细胞T细胞受体-α/β(TCR-α/β)阳性,+%,培养前后CD56+细胞增加1071倍,增殖的CIK细胞主要为CD3+CD56+细胞。陆佩华等[7]在研究CIK细胞时也发现CD3+CD56+细胞绝对值对数在培养第10天后显著增加。CD3+CD56+的CIK细胞绝大部分共同表达CD2、TCRα/β、CD5、CD8,而很少有此类细胞表达CD4、CD16、TCRγ/δ[8]。Brandt等[9]比较了白血病病人和健康人的外周血单个核细胞制备的CIK细胞,发现两者免疫表型无明显差别。Wolf和陆佩华等研究者均发现CD3+CD56+CIK细胞来源于CD3+CD56-的T淋巴细胞而非CD3-CD56+的NK细胞[6、7]。陆佩华等进一步将T细胞分为CD4+、CD8-、CD4-、CD8+、CD4-CD8-CD4+CD8+细胞亚群,并加入IL-2和抗CD3,单抗等培养1月后行流式细胞仪检测,发现CD4+CD8-T细胞不会诱导生成表达CD56的细胞,而大约四分之一的CD4-CD8+